实验动物染毒途径和技术-1
<(一)经口(胃肠道)染毒>
在毒理学试验中染毒途径的选择，应尽可能模拟人在接触该受试物的方式。最常用的染毒途径为经口、经呼吸道；经皮及注射途径。染毒的途径和方法根据实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况确定。不同途径的吸收速率，一般是静脉注射>吸入>肌内注射>腹腔注射>皮下注射>经口>皮内注射>其他途径(如经皮等)
(一)经口(胃肠道)染毒
常用有喂饲、灌胃和吞咽胶囊等方式。
1．喂饲 将受试物掺人动物饲料或饮水中供实验动物自行摄人。如果受试物是完全无毒的，则在饲料中的最高含量可为5％，一些有营养价值的食物成分物质则可更高，但应注意不要造成饲料营养成分失衡而影响实验动物的生长发育。喂饲法符合人类接触受试物的实际情况，但缺点多，如适口性差的受试物，实验动物拒食；易挥发或易水解的受试物不适用。而且，实验动物应单笼喂饲，以食物消耗量计算其实际染毒剂量。
2．灌胃 将受试物配制成溶液或混悬液，以注射器经导管注入胃内。一般灌胃深度从口至剑突下。最好是利用等容量灌胃法，即受试物配制成不同浓度，实验动物单位体重的灌胃容量相同。外源化学物用溶剂稀释，一般讲浓溶液比稀溶液毒性大，但是也有的外源化学物稀释之后毒性反而增加，即存在所谓“稀释毒性”，其原因尚不清楚。因此在发现有稀释毒性时等浓度灌胃法也可接受。灌胃前应禁食空腹，大鼠隔夜禁食，小鼠可禁食4h(因小鼠消化吸收和代谢速度较快)，均不停饮水。灌胃后2—4h提供饲料。经口多次染毒，一般不禁食，但应每日定时染毒。灌胃法适用小鼠、大鼠、兔、犬等动物，优点是剂量准确，缺点是工作量大，并有伤及食管或误入气管的可能。
(1)小鼠灌胃法；左手拇指和食指捏住小鼠头部两耳后皮肤，无名指或小指将尾部紧压在手上，使小鼠腹部向上。右手持灌胃管(1～2ml注射器上连接以14号注射针头，尖端磨钝，稍加弯曲的灌胃管)，灌胃管长4～5cm，直径约lmm。操作时，经口角将灌胃管插人口腔，用胃管轻压小鼠头部，使口腔和食管成一直线，再将胃管沿上腭壁轻轻插入食管内，当推进约2～3cm左右时，灌胃管前端约到达膈肌水平(体重20g左右的小鼠)，此时可稍感有抵抗。如此时动物无呼吸异常，即可将药注入。如遇阻力或动物憋气则应抽出重插管。如误插入气管注药时可引起动物立即死亡。药液注完后轻轻退出胃管。操作时宜轻柔，以防损伤食管及膈肌。
(2)大鼠灌胃法：灌胃法与小鼠相似。采用的灌胃管长约6～8cra，直径约为1．2mm，尖端磨钝。插管时，为防止插人气管，应先抽回注射器针栓，无空气抽回说明不在气管内，即可注药。
(3)犬和家兔灌胃法：由2人操作，将犬关人特制犬笼，并移动活动栅，挤犬并使之固定，持犬者两手握住犬耳后及颈部皮肤，使犬头部朝上颈部拉直。灌胃者用一木棍让犬咬住，将硬质胃管自木棍与上腭之间插入食管，约20cm左右即下达到胃腔(插入深度可预先在体外测量好，并做好记号)；持兔者端坐两腿夹住兔躯干及其后肢，两手握住兔耳及前肢，将兔头朝上，使兔颈部拉直。灌胃者用开口器通过兔口角(在犬齿后)之空隙，将开口器向下转动数次，使兔舌伸出。开口器的孔应放置在口腔正中央，将硬质胃管通过开口器小孔插入食管，约10－15cm左右即下达到胃腔。如胃管进人胃内，动物较安静，无挣扎、气促等表现，应先抽回注射器针栓，无空气抽回说明不在气管内，即可用注射器推入药液，再推入2～3mi水，以送人留滞在胃管内的药液，灌胃完毕，迅速抽出胃管，然后取出木棍或开口器。
3．吞咽胶囊 将一定剂量的受试物装入胶囊中，放至犬的舌后部，迫使动物咽下，此法剂量准确，适用于易挥发、易水解和有异味的受试物。
<(二)经呼吸道染毒>
经呼吸道染毒可分为吸入染毒和气管内注入。
1．静式吸人染毒
将一定数量的啮齿类动物放在密闭的染毒柜中，加人易挥发的液态受试物或气态受试物使成一定浓度。静式吸入染毒简易，但缺点较多，主要是随试验进行氧分压降低(因此，实验动物数量有限制)，柜内受试物浓度也逐渐下降(由于动物吸人消耗、为被毛及染毒柜壁吸附所致)，而且实验动物有经皮吸收的可能。染毒时间一般为2h。要求受试物在lOmin内蒸发完毕。
柜顶盖部有三个附件。一个是投药孔，在孔下方用多层纱布或滤纸作为接受和蒸发液态受试物的药物蒸发器；一个是用于混匀蒸气或气体的小电扇；一个是插人温度计的孔。在柜的下部的1／4处还留有一个供采样的孔。
静式吸人染毒时应根据染毒柜容积和染毒时间，确定放置的实验动物数，以保证动物的最低需气量(表1—4)。染毒柜所需容积也可按实验动物总体重(kg)×100×染毒时间h)来估算，相当于动物每kg体重每小时所需空气体积为100L。
静式吸入染毒多以计算方法得到染毒柜内受试物浓度，受试物浓度以mg／m．易挥发液体化学物计算公式为
C＝(a·d·l000)／L
式中：C＝设计的染毒浓度(mg亿)；a＝加入受试物的量(m1)；L：染毒柜容积(L)。
气态化学物加入为m1数，可依据染毒柜容积折算为ppm。单位mg／ml：
记算公式为(式中MW为受试物的分子量)：mg／m3＝(MW·ppm)／22.4
可在染毒期内测定受试物浓度2～3次，以其均值作为实际染毒浓度。
表1—4 实验动物的最低需气量及不同染毒柜容积应放置的动物数(染毒2h)
