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ABO正反定型不符的问题分析及解决办法(二)

2021.5.27

二、解决ABO定型不一致的指导原则

(一)出现弱反应或缺失抗原的解决方案

出现弱/缺失抗原的可能情况

1. A亚型、B亚型或AB亚型

2. 疾病状态:如白血病导致A或B抗原减弱,何杰金病(Hodgkin’s)有时会抑制抗原表达,与白血病类似。

3. 过量的血型物质:由于某种疾病(如腹腔癌、胰腺癌、卵巢囊肿)导致血浆中存在大量的型物质,中和抗-A或抗-B抗体,引起正定型为假阴性或弱阳性。通过洗涤红细胞可解决此问题。

4. 获得性B

5. 抗-A或抗-B试剂中存在低频抗原的抗体

出现弱/缺失抗原的解决措施

1. 洗涤RBC且延长孵育时间进行试验,如果使用洗涤红细胞后反应加强,则考虑是型物质的抑制

2. 酶处理红细胞再次试验

3. 吸收放散确定是否是亚型。

4. 了解输血史(尤其是O型红细胞输注)来分析混合视野

5. 了解病情诊断(尤其是白血病)

6. 了解是否是骨髓移植受者

7. 了解是否是双胞胎

8. 是否使用从前未使用过的单克隆抗体血清进行了血型鉴定

9. 分泌型型物质检查

10. 进行玫瑰花试验来确定是否混入其它红细胞,或进行细胞分离

11. 如果是弱A或弱B遗传,则检查红细胞上H抗原的表达  

患者的正定型与正常反应强度相比属于减弱的反应。从反定型中可以看出,患者血清中不存在ABO系统以外的抗体干扰,也不存在自身抗体的干扰,因和B细胞产生反应,表明红细胞上可能具有A抗原。在正定型中与国产的单克隆抗-A无反应活性,而和抗-AB有弱反应,暗示A亚型的可能。

通过吸收放散、型物质检查确认A亚型。可能是A3。

(二)出现弱反应或缺失抗体的解决措施

出现弱反应或缺失抗体由四种情况引起

1. 年龄:新生儿及老人。

2. 低球蛋白血症:如白血病人、使用免疫抑止药物、低球蛋白的淋巴瘤病人(恶性)、骨髓移植后病人。

3. 丙球缺乏血症:如免疫缺陷病人

4. 双胞胎嵌合体

解决方案

1. 延长反应时间

2. 于室温及4℃检查血清中的抗体。用A、B、O及自身红细胞进行检查

3. 于室温及4℃检查血清中抗体。用酶处理的A、B、O及自身细胞进行检查。可能需要在试验前进行冷抗体的自身吸收

4. 确定病人年龄及临床诊断(如新生儿、免疫病)

5. 确定输血史(非ABO同型的血浆输注)

补充试验:正反定型分别在室温及4度孵育30分钟

可能血型为O型,但具有低效价的抗-A

(三)出现多余抗原(额外抗原)的解决方案

出现多余抗原的可能情况

1. 抗原发生改变:

(1)获得性B:肠道疾病患者,细菌作用导致

(2)多凝集现象:红细胞被掘大多数人的正常血清凝集

2. 红细胞已经被抗体包被:如自家免疫溶血性贫血、输血反应及HDN。

3. 非抗-A及抗-B的抗体与相应抗原形成复合体吸附在红细胞表面,引起正定型非特异性凝集。(洗涤红细胞)如抗血清添加剂:染料的抗体与抗体结合附着在红细胞表面导致。

4. 混合视野:非同型输注,如O型红细胞给其他型输用,非ABO同型的骨髓移植,A3亚型等。

5. 低频率抗原抗体反应:定型血清中的存在低频抗原的抗体,与对应的低频抗原产生阳性反应。

解决措施

1. 将红细胞洗涤再进行试验,确定是否是病人或献血员的血清中存在针对ABO定型试剂成分的抗体

2. 用O型及自家红细胞于室温检查病人血清,确定血清中是否有冷自家抗体,如果有,则用2ME或DTT处理。

3. 用不同厂家的试剂检查洗涤的红细胞

4. 了解病人的临床诊断

5. 如果怀疑是获得性B,则用酸化的抗-B检查

6. 进行ABH分泌型型物质检查

7. 如果用多克隆抗-A检查结果是混合视野,则用蛋白酶处理RBC试验,考虑是否是多凝集

解决方案: 询问病史,尤其是下消化道疾病,用酸化的抗-B(pH 6.0)检查

在反定型试验中可以看出,O型红细胞和自身对照皆为阴性,表明反定型试验结果可靠,即为O型。而在正定型试验中均为阳性,可能出现的阳性反应不属于ABO系统的抗原抗体反应。需要了解定型血清是否是人血清来源,并了解被检者的疾病诊断,使用非人血清来源的标准定型血清来进行正定型。可能血型为O型的多凝集现象。

可能血型O,由于抗-B染料丫啶黄和标清中的相应抗体形成复合物附着在红细胞表面,造成正定型中出现和红细胞产生3+的非特异性阳性反应。

(四)出现额外抗体:

产生未知的抗体反应的可能情况

1. 蛋白或血浆不正常引起的缗钱状凝集:

血清蛋白浓度异常,球蛋白浓度由于疾病而升高(多发性骨髓瘤),原发性居球蛋白血症,纤维蛋白原浓度升高,血浆扩容剂的使用以及何杰金氏淋巴瘤,新生儿脐血中的华通氏胶。

2. 冷反应性自身抗体:

存在ABO系统的意外抗体:如A2或A2B个体血清中可能存在天然抗-A1,顺式AB人群中弱的抗-B,导致反定型试验多出抗体。

3. 被检者血清中存在ABO系统以外的特异性冷同种抗体,反定型时出现假阳性反应。(谱细胞鉴定抗体特异性):如抗-M、抗-N等.

解决方案

1. 于室温及4℃检查,确定是否存在自身抗体或冷同种抗体

2. 洗涤红细胞再次进行试验,防止血清中有针对试剂红细胞保存液成分的抗体

在37℃定型,去除冷自生抗体干扰后定型,型物质检测

解决方案: 使用抗-A1血清进行正定型鉴定

(2)或O型有ABO以外不规则抗体

解决方案:(1)在正定型中添加抗-H检查

(2)不规则抗体鉴定

(五)混合视野凝集的解决方案

1. 确定是否近期怀孕或输血

2. 确定临床诊断(尤其是白血病)

3. 是否是骨髓移植受者

4. 是否是双胞胎

5. 用细胞分离术将两群细胞分开,分别定型

6. ABH型物质检查

7. 了解输血史


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