去乙酰毛花苷的检查及鉴别方法
鉴别
(1)取本品约2mg,置试管中,加冰醋酸2ml溶解后,加三氯化铁试液1滴,摇匀,沿试管壁缓缓加硫酸2ml,在两液层接界处即显棕色,冰醋酸层显蓝绿色。(2)取本品约2mg,置试管中,加乙醇2ml溶解后,加二硝基苯甲酸试液与乙醇制氢氧化钾试液各10滴,摇匀,溶液即显红紫色。(3)照薄层色谱法(通则0502)试验供试品溶液取本品,加甲醇溶解并稀释制成每1m中含0.2mg的溶液对照品溶液取去乙酰毛花苷对照品,加甲醇溶解并稀释制成每1ml中含0.2mg的溶液色谱条件釆用硅胶G薄层板,以二氯甲烷-甲醇-水(84:15:1)为展开剂测定法吸取供试品溶液与对照品溶液各10μl,分别点于同一薄层板上,展开,晾干,喷以硫酸-乙醇(1:9),在140℃加热15分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。结果判定供试品溶液所显主斑点的位置和荧光应与对照品溶液的主斑点相同(4)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。以上(3)、(4)两项可选做一项
检查
有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品,加少量甲醇超声使溶解,用流动相稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以水为流动相A,以乙腈甲醇(22:14)为流动相B,按下表进行梯度洗脱;检测波长为220nm;进样体积20pl时间(分钟流动相A(%)流动相B(%)系统适用性要求去乙酰毛花苷峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍(2.5%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的5倍(5.0%)。干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过1.0%(通则0831)。
