Western Blot实验相关试剂的配制（二）
100mg/ml 牛血清白蛋白（BSA）
BSA 0.1g
0.15 mol/L NaCl 1ml
溶解后-20℃保存。制作蛋白标准曲线时，用0.15 mol/L NaCl进行100倍稀释成1mg/ml，-20℃保存。
还原型 5XSDS 上样缓冲液
0.5 mol/L Tris·HCl （pH6.8） 2.5ml
二硫叔糖醇（DTT，MW154.5） 0.39g
SDS 0.5g
溴酚蓝 0.025g
甘油 2.5ml
混匀后，分装于 1.5ml 离心管中，4℃保存。
Tris （MW121.14） 3.03g
甘氨酸（MW75.07） 18.77g
SDS 1g
蒸馏水至 1000ml
溶解后室温保存，次溶液可重复使用 3～5 次。
（电泳液可以回收重复利用，一般将回收的电泳液加入垂直电泳槽的下半部分，上半部分最好使用新鲜的电泳缓冲液）
（可以配制成 10×电泳缓冲液进行保存，稀释 10 倍使用）
半干
24mmol/L Tris （MW：121.14） 1.4536 g
192mmol/L 甘氨酸（MW：75.07） 7.20672 g
20 ％甲醇 100 ml
蒸馏水至 500ml
浸渍（湿转）
48mmol/L Tris 2.375g
39mmol/L 甘氨酸 11.25g
20 ％甲醇 200ml
0.0375％SDS 0.375g
蒸馏水至 1000 ml
溶解后室温保存，次溶液可重复使用 3～5 次（次溶液最好保存在 4 度冰箱，最多使用 5 次左右，不然影响转移效率）。（先用蒸馏水溶解甘氨酸、Tris 和 SDS，然后再加入甲醇，最后补足液体。如果先加入甲醇，溶解甘氨酸、Tris 和 SDS 等比较困难）
（可以配制成 2×转移缓冲液进行保存，稀释后使用）
10X 丽春红染液
丽春红 S 2g
三氯乙酸 30g
磺基水杨酸 30g
蒸馏水至 100ml
1 mol/L Tris·HCl （pH7.5） 10ml
NaCl 8.8g
蒸馏水至 1000ml
（可以配制成 10×TBS 缓冲液进行保存，稀释 10 倍使用）
20 ％Tween20 1.65ml
TBS 700ml
混匀后即可使用，最好现用现配。
封闭液
脱脂奶粉（国产） 5g
TBST 100ml
最好现用现配。
14.4 mol/L β-巯基乙醇 700μl（通风厨里加）
SDS 2g
0.5mol/L Tris·HCl （pH6.8） 12.5ml
超纯水至 100ml
配制时，在通风厨内进行。4℃保存。可重复使用 1 次。（可用可不用）
