解读：临床微生物标本检验流程（一）
一、临床标本细菌检验的基本程序
二、血液感染
◆正常人的血液是无菌的。
◆菌血症是指在血液中可检测到细菌，包括一过性和持续性在血中存在。
◆败血症是指病原菌侵入血流后，在其中大量繁殖并产生毒性产物，引起全身中毒症状。
◆脓毒血症是指化脓性细菌败血症时，细菌通过血流扩散至全身其他组织或器官，产生新的化脓性病灶。
（一）常见病原菌
（二）标本采集
1.采血时间和频率
病人发热初期或高峰期采集，或在未用抗生素前采集。但怀疑细菌性心内膜炎时，血培养不少于三次。
2.采血量
一般为静脉采血，成人采血量10～20ml，儿童3～5ml，婴儿1～2ml。
3.床边直接注入血液培养基，否则用SPS抗凝剂送检，不得用EDTA，枸橼酸钠抗凝。
4.检查血管内导管有无细菌污染，可无菌操作，剪下导管5cm远侧段，置无菌容器内送检。
（三）微生物分离培养和鉴定
1.培养基的选择
用自动血培养分析仪时选用相应的血培养瓶，如需氧＋厌氧，需氧＋高渗等。
2.分离和鉴定 当观察有细菌生长时或血培养仪阳性报警时，应及时作如下检验：
（1）涂片染色镜检，结果及时与临床联系；
（2）转种血平板、巧克力平板、厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养纯菌再进行鉴定；
（3）同时做药敏试验，结果及时报告临床作治疗参考。
（四）报告方式
阴性结果：
◆7d报告无细菌生长。
◆疑为亚急性细菌性心内膜炎、布鲁菌病、厌氧菌血症、真菌血症时，血培养至少连续培养2～3周，仍无细菌生长者可报告为阴性。
阳性结果——三级报告方式：
◆第一级报告告知标本已出现阳性并报告直接细菌涂片结果，同时做初步药敏试验；
◆第二级是报告初步药敏结果，同时做正式鉴定和药敏试验；
◆第三级报告正式鉴定和药敏试验结果。
（五）临床意义
◆葡萄球菌菌血症常由疖、痈、脓肿及烧伤创面等原发感染灶继发，也可由呼吸道感染引起。
◆G-菌主要侵犯危及机体免疫功能低下的病人，耐药菌株不断增加。
◆厌氧菌的菌血症常合并需氧菌感染，临床症状较重而复杂。
◆L型菌的菌血症主要由于使用抑制细菌细胞壁合成的抗生素后，由缺损细胞壁的细菌感染所致。
◆免疫低下者常出现真菌菌血症。
◆院内感染菌血症不断上升。
三、中枢神经系统感染
（一）常见病原微生物
（二）标本采集
◆用药前，无菌操作腰穿方法采集2～3ml，盛于无菌试管常温下立即送检。
◆天冷时保温，不可冰箱保存。
◆用于病毒检测时应冷藏送检。
（三）检验方法
1.涂片镜检 离心3000rpm，15分钟。
革兰染色（一般细菌）、抗酸染色（分支杆菌）、墨汁染色（隐球菌）、电镜检查（病毒颗粒）。
2.分离培养 5g/L葡萄糖增菌肉汤、血平板、中国蓝琼脂平板或麦康凯琼脂平板、巧克力平板。结核菌接种罗-琴培养基或米氏7H10培养基。真菌培养接种沙氏培养基。病毒培养常用动物接种、鸡胚接种、细胞培养。
3.血清学检测可直接检测抗原。
（四）临床意义
◆细菌性脑膜炎是中枢神经系统感染的常见类型。
◆真菌性脑膜炎最常见于隐球菌脑膜炎，其他的真菌性脑膜炎如白假丝酵母、球孢子性脑膜炎日渐增多，特别是免疫功能低下和恶性疾病患者易发。
◆流行性乙型脑炎可获得持久免疫力，再次发病者极少见。
◆肠道病毒对中枢神经系统的危害性逐渐引起人们的关注和重视。
