华法林钠的检查方法
碱度取本品0.10g,加水10ml溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为7.2~8.3溶液的澄清度取本品0.50g,加水10ml溶解后,溶液应澄清;如显浑浊,与1号浊度标准液(通则0902第一法)比较,不得更浓丙酮溶液的澄清度与颜色取本品0.20g,加丙酮10ml溶解后,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液(通则0902第一法)比较,不得更浓;如显色,照紫外可见分光光度法,依法检查(通则0401),在460nm的波长处测定吸光度,不得过0.03酚酮取本品,加5%氢氧化钠溶液制成每1ml中含0.125g的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401),在15分钟内在385nm的波长处测定吸光度,不得过0.30。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品,加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含2g的溶液。系统适用性溶液取华法林钠、亚苄基丙酮与4-羟基香豆素,加流动相溶解并稀释制成每1m中各约含50g的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈水冰醋酸(55:45:1)为流动相;检测波长为282nm;进样体积20l。系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,理论板数按华法林钠峰计算不低于2000,4羟基香豆素峰与亚苄基丙酮峰的分离度应大于10.0,亚苄基丙酮峰与华法林钠峰的分离度应大于5.0。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.1%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍(0.5%)。异丙醇照气相色谱法(通则0521)测定。内标溶液1%丙醇溶液供试品溶液(1)取本品约0.5g,精密称定,置10m量瓶中,精密加内标溶液5ml,加水溶解并稀释至刻度,摇匀。供试品溶液(2)取本品约0.5g,精密称定,置10ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀对照品溶液取异丙醇约0.785g,精密称定,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,并精密加内标溶液5ml,混匀。色谱条件用涂有10%聚乙二醇1500的101白色担体为固定相;柱温70℃。测定法精密量取供试品溶液(1)、供试品溶液(2)与对照品溶液,分别注入气相色谱仪,记录色谱图,按内标法以峰面积计算供试品中含有异丙醇的量限度应为7.5%~8.5%(g/g)。水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分不得过2.0%。
