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抗血清的制备

2019.9.02

一、目的:

1、了解抗血清制备的基本过程:

2、掌握抗血清的收集和保存方法。

二、原理:

抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。

一种抗原能否引起抗体生成反应,一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇(Antigenic determinant),另一方面取决于机体的免疫状态,当具备以上两个条件后,抗体生成将遵循抗体生成的一般规律——初次反应和再次反应。

抗原的种类繁多,包括天然的蛋白质抗原和细胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫动物具有不同的特殊性。一般完全抗原免疫动物需加用佐剂,尤其在使用可溶性抗原时,以期得到高效价的抗血清;合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物质需先通过人工的方法与蛋白质载体连接后再与佐剂混合免疫动物,方可获得理想的免疫效果。使用佐剂后可增加抗原的免疫原性和延长抗原在机体内存留的时间,从而改变了抗原原有的免疫原性。

三、材料:

1、金属编号牌(对动物作标记录)或染料;

2、1毫升,5毫升、20毫升注射器;

3、采血针头(9#,12#),卡价苗针头(41/2  # — 51/2  #);

4、灭菌平皿,疫苗瓶,青霉素瓶,皮塞以及吸管,脱脂棉;

5、卡介苗(75mg/ml);

6、抗原(小鼠血清);

7、青霉素溶液,链霉素溶液和5%葡萄糖溶液;

8、液体石腊(医用),羊毛腊(配制佐剂用);

9、灭菌生理盐水,消毒用酒精,2.5%碘酒;

10、1.5%琼脂,玻板,饭盒(保湿、保湿作用);

11、实验动物(家兔)。

四、实验步骤

1、动物的选择

羊、马、鸡、猴、豚鼠、兔都是常用的免疫动物,在实验中,选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体等因素。免疫用动物应选适龄、健壮.最好为雄性。最常用的实验动物是家兔,一般选择选择年龄在6个月以上当年繁殖的♂性,体重2 ~3公斤,健康家兔三只,免疫前用金属编号牌固定兔耳,或用染料涂沫在动物的背部,作出明确的标记。



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