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蛋白质复性人工分子伴侣的介绍

2022.10.30

  受蛋白质分子伴侣辅助蛋白质复性的启发,Rozema和Gellman对人工分子伴侣体系(去污剂+环糊精)辅助碳酸酐酶和鸡蛋白溶菌酶复性进行了研究[17、18]。与分子伴侣GroEL+ATP辅助复性的作用机制相似,其复性过程分为两步进行:第一步捕获阶段,在变性蛋白质溶液中加入去污剂,去污剂分子通过疏水相互作用与蛋白质的疏水位点结合形成复合体,抑制肽链间的相互聚集;第二步剥离阶段,加入环糊精,由于环糊精分子对去污剂分子有竞争性吸附作用,去污剂分子被剥离下来,从而使多肽链在此过程中正确折叠为活性蛋白质[17、18]。其反应机制可用下式表示:

  U→U-dn→→→U-dn-m→→→F→N

  即伸展态U首先与去污剂d形成复合物U-dn,加入环糊精后,小分子去污剂被逐次剥离下来,变为部分折叠、不含去污剂分子的非活性状态F,进而折叠为天然活性蛋白质N。

  与GroE等蛋白质分子伴侣相比,联合使用去污剂和环糊精作为人工分子伴侣辅助蛋白质复性具有明显的优点:

  ①人工分子伴侣不属于蛋白质,不易受环境影响而失活,操作条件较为宽松;

  ②去污剂和环糊精均可直接购买,省去分离纯化的步骤;

  ③去污剂与环糊精的分子量较小,容易与蛋白质分离,有利于提高工业生产效率。

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