网织红细胞计数及临床意义
（一）检测原理
网织红细胞（Ret，RET）是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞，属于尚未完全成熟的红细胞，其胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸（RNA），经活体染色（新亚甲蓝、灿烂甲酚兰（煌焦油蓝）、中性红等染料）后，形成核酸与碱性染料复合物，呈深染的颗粒状或网状结构。凡含两个以上的深染颗粒或具有线网状结构的无核红细胞，即为网织红细胞。
1、普通光学显微镜法：在显微镜下计数1000个红细胞中网织红细胞的百分比或分数。
2、网织细胞计数仪法和血液分析仪法：用荧光染料（如吖啶橙、派若宁-Y、噻唑橙）使网织红细胞内RNA着色，用流式细胞术（FCM）得到网织红细胞数。
（二）方法学评价
1、普通光学显微镜法：试管法操作简便、重复性较好。玻片法取血量少、染色时水分易蒸发，造成结果偏低。但显微镜法受主观因素影响较多，且耗时费力。
2、网织细胞计数仪法：可客观地将Ret分成高荧光强度网织红细胞（HFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）、低荧光强度网织红细胞（LFR）三类，有助于化疗、放疗、移植患者的监测。
3、血液分析仪法：可提供网织红细胞绝对值（Ret）、网织红细胞百分比（Ret%）、网织红细胞分布宽度（RDWr）、网织红细胞平均体积（MCVr／MRV）、网织红细胞血红蛋白浓度（HCr）、网织红细胞平均血红蛋白浓度（MCHCr）、网织红细胞血红蛋白分布宽度（HDWr）、LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数（RMI，RMI=（MFR+HFR）／LFR×100）。仪器法优点是测量细胞多、避免主观因素、方法易于标准化。
（三）质量控制
1、显微镜法
影响因素有：操作人员对网织红细胞识别不同、血涂片质量好坏、计数红细胞数量多少、计数方法等。Miller窥盘法计数网织红细胞误差可减小，网织红细胞95%可信限为：
2、仪器法：仪器法计数红细胞10000～50000个。出现Howell-Jolly小体、有核红细胞、巨大血小板会使结果假性增高。
（四）参考值
显微镜计数法：成人0.008～0.02或（25～75）×10 9／L，新生儿0.02～0.06。仪器法：表1-2-5。RMI：男性为9.1%～32.2%，女性为12.8%～33.7%。
（五）临床意义
网织红细胞计数（尤其是网织红细胞绝对值）是反映骨髓造血功能的重要指标。正常情况下，骨髓中网织红细胞均值为150×109／L，血液中为65×109/L。当骨髓Ret增多，外周血减少时，提示释放障碍；骨髓和外周血Ret均增加，提示为释放增加。从网织红细胞成熟类型获得红细胞生成活性的其他信息，正常时，外周血网织红细胞中Ⅲ型约占20%～30%，Ⅳ型约占70%～80%，若骨髓增生明显，可出现Ⅰ型和Ⅱ型Ret。
1、判断骨髓红细胞造血情况
（1）增多：见于
①溶血性贫血：溶血时大量网织红细胞进入血循环，Ret可达6%～8%，急性溶血时，可达约20%，甚至50%以上，绝对值超过100×109／L。急性失血后，5～10d网织红细胞达高峰，2周后恢复正常。
②放疗、化疗后：恢复造血时，Ret短暂和迅速增高，是骨髓恢复较敏感的指标。
③红系无效造血：骨髓中红系增生活跃，外周血网织红细胞计数正常或轻度增高。
（2）减少：见于再生障碍性贫血、溶血性贫血再障危象。典型再生障碍性贫血诊断标准之一是Ret计数常低于0.005，绝对值低于15×10 9／L。
2、观察贫血疗效
缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血患者治疗前，Ret仅轻度增高（也可正常或减少），给予铁剂或维生素B12、叶酸治疗后，用药3～5天后，Ret开始上升，7～10天达高峰，2周左右，Ret逐渐下降，表明治疗有效。
3、骨髓移植后监测
骨髓移植后第21天，如Ret大于15×109／L，表示无移植并发症；小于15×109／L，伴嗜中性粒细胞和血小板增高，可能为骨髓移植失败。
4、网织红细胞生成指数（RPI）
是网织红细胞生成相当于正常人的倍数。不同生理、病理情况下，Ret从骨髓释放人外周血所需时间不同，故Ret计数值不能确切反映骨髓红细胞系统造血功能，还应考虑Ret生存期限。通常Ret生存期限约为2d，若未成熟网织红细胞提前释放人血，Ret生存期限将延长，为了纠正网织红细胞提前释放引起的偏差，用网织RPI来反映Ret生成速率。计算公式为：被测网织红细胞百分比。在估计红细胞生成有效性方面，使用RPI较准确。
