关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

DNA合成仪在生物学中的应用

2021.8.27

DNA合成仪在分子生物学领域中的应用非常广泛,大体可以概括为以下几个方面。

1.合成PCR引物,DNA测序引物和杂交探针

2.合成生物素标记的DNA包括生物素标记的引物

用于DNA固相测序法(solid-phasesequencing),采用生物素标记的引物进行PCR扩增,再用抗生物素蛋白钓出扩增产物,由于抗生物素蛋白与磁珠共价结合,所以用磁铁吸附即可钓出扩增产物,大大简化了DNA测序模板的纯化步骤。此外,生物素标记的探针用于非放射性杂交检测。DNA合成仪可用于合成生物素标记的探针和引物。

3.合成荧光素标记的DNA包括荧光素标记的引物

可在合成的DNA片段5’端标记几种不同颜色荧光素(6-FAM、TET、HEX),用于全自动DNA测序仪,还可用于PCR片段大小分析及定量分析,即基因组型分析和基因表达水平的研究。此外荧光素标记的探针用于原位PCR杂交检测,进行基因在染色体上的定位。而荧光素标记的DNA包括荧光素标记的引物皆可采用DNA合成仪进行合成。

4.合成反义核酸

反义核酸可用于反义调控和基因治疗。反义调控指在体外合成与靶序列互补的DNA片段,转化细胞后与靶序列结合,即在转录水平上抑制基因表达,但由于细胞内存在限制酶系统会把外源核酸降解,所以反义核酸要经硫化修饰后再转化细胞。另外癌症、艾滋病等也可采用反义核酸进行基因水平的治疗。DNA合成仪是合成反义核酸的仪器。

5.合成磷酸标记的DNA

用DNA连接酶把合成的磷酸标记的DNA片段连接起来,在体外进行基因构建。磷酸标记的DNA常用DNA合成仪来合成。

6.合成RNA

用DNA合成仪合成的RNA主要用于核酶研究,核酶可作为生物导弹转化到细胞中,定点切割有病基因,如癌基因等。
 




推荐
关闭