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数字PCR的原理

2022.2.28

数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性)。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多。 在扩增期间,TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时,没有信号累积。 PCR 分析后,阴性反应片段用于生成样品中靶标分子的绝对计数,而无需标准品或内标。

  • 数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。

  • PCR实际上是一个在模板DNA、引物(模板片段两端的已知序列)和四种脱氧核苷酸等存在的情况下,DNA聚合酶依赖的酶促合成反应,扩增的特异性取决于引物与模板DNA的特异结合。

  • 病原体检测

精确地对靶 DNA 或 RNA 分子中的细微变化进行定量分析,从而检测和监测病原体。

  • 与新一代测序 无缝对接

无需使用标准曲线,直接对 NGS 库执行绝对定量分析。

  • 基因表达分析

可对少量 mRNA 和 miRNA 的细微变化进行准确及重复性极佳的检测。

  • 环境监测

使用 QX200 系统可测试多种环境样品,例如土壤和水。

  • 食品检测

采用经过验证的 ddPCR 方法对转基因生物体 (GMO) 进行评估。


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