竞争性pcr原理
竞争性PCR 是靶基因与参考标准在同一反应管中共同扩增，用参
考标准作对照估计出一种特异性靶DNA或RNA分子的相对含量。
• 竞争PCR 有效地控制了不同反应管间扩增效率的差异。
竞争 PCR -理论基础
在PCR扩增过程中，PCR产物的量用公式Y= A （1+R）n表示，其Y表示PCR产物的量，A表示初始 模板的量，R表示PCR的扩增效率，n表示PCR的循环 数，当PCR扩增效率相同时，PCR产物的量与初始模 板的量成正比。 — 相似的基因序列，同一引物，相同的引物结合位 点, 扩增效率一致。最终混合PCR产物中，待分析 样本与竞争底物终产物的比值直观地反映了两者初 始状态时核酸含量比值。
多重 + 竞争 PCR -优势
a.通量高：每个反应孔内可同时检测10个基因；
b.经济：适合大样本多个基因同时检测，大大缩短了实验周期，提高了
实验效率。
c.检测分辨度高：可有效分辨低至15%的表达量差异；
d.重复性好：在对已知浓度RNA进行递增稀释后，进行多重表达分析
线性关系好R2＞0.99；
e.准确性高：目标/参照基因片段与内对照基因片段间序列基本一致
性， 保证终扩增产物真实反应初始模板量比，一个或多个参
照基因与检测 基因在同一管内反应，每个基因的表达量都利
用竞争性PCR进行精确 测定。
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