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血清学检测方法的原理

2021.11.25

血清学检测方法,在医学及生物学研究中起着重要的作用,并被广泛应用。其基本原理,就是利用抗原(antigen)抗体(antibody)特异反应来实现的。抗原,分成完整抗原和半抗原,完整抗原是一种具有生物学活性物质或化合物,当它被注射到动物中时能诱导产生特异抗体,抗原和它诱导产生的特异抗体能产生免疫反应;而半抗原,本身不能诱导动物产生特异抗体(除非被交联到某些载体上),但能和抗体产生反应。生物体内许多成分都是很好的抗原,如蛋白质、多糖、脂类等。核酸虽然也能作为抗原,但不能诱导产生区分核酸序列的抗体,没有多少实际应用价值。一种抗原可能具有诱导产生多个抗体的空间机构,即具有多个抗原决定族,每个抗原决定族能诱导产生一种抗体,因此动物血液中往往同时存在许多种抗体,每种抗体由一种细胞产生,从血液中直接分离得到的抗体,叫做多克隆抗体。

一个产生抗体的细胞扩大培养,再分离得到的抗体叫做单克隆抗体。抗原抗体反应是一种非共价键特异性吸附反应,即通常情况下,抗原只和它自己(或者具有相同抗原决定族的抗原)诱导产生的抗体发生反应,因此血清学反应具有高度的专一性。

抗原抗体反应,虽然能产生肉眼能见到的凝聚反应,可用于检测,但此法灵敏度不够而且需要大量的抗原抗体,现在很少应用。在实际工作中应用最多的现在有两种方法,一种叫做酶联免疫法(ELISA),此法则通过酶反应将抗原抗体反应信号放大,从而提高了检测灵敏度,而且还能通过产生有颜色的底物用仪器或肉眼识别,此法一般在酶联板上或膜上进行,进行一次检测需要4h左右;另一种叫做试纸条法,此法主要将特异的抗体交联到试纸条上和有颜色的物质上,当纸上抗体和特异抗原结合后,再和带有颜色的特异抗体进行反应时,就形成了带有颜色的三明治机构,并且固在试纸条上,如果没有抗原,则没有颜色。血清学检测快速、具有一定的灵敏度也能进行半定量,尤其是试纸条法,不需要特殊的仪器设备,在现场检验或初筛中具有较好的应用前景。


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