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酸-尿素连续 PAGE

2019.3.29
实验材料

冷冻干燥后的蛋白样品或块状蛋白样品

试剂、试剂盒

丙烯酰胺二苯基碘酰氯贮存冰醋酸亚甲基蓝储存液槽缓冲液上样缓冲液对甲苯亚磺酸钠尿素

仪器、耗材

光源

实验步骤

1.按以下配方制备凝胶混合物(15% 丙烯酰胺、2.5mol/L 尿素、O.9mol/L 醋酸,PH2.7)。


2.往微型胶模具中灌制凝胶。

3.在恒定的照明条件下光聚合 2 h。不需要做预电泳。

4.往缓冲液槽中注满缓冲液。

5.溶解蛋白样品到上样缓冲液中,使蛋白终浓度达 35 mg/ml。

6.将溶好的蛋白样品加至凝胶上样孔中。

7.开始电泳,由正极到负极。采用厂商推荐的最佳电压。例如,使用 Bio-RadMini-ProteannCellmini 胶时,采用 130V 电压。

8.待染料前沿到达凝胶底部时,关掉电源停止电泳。

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