羧苄西林钠的检查方法
酸碱度取本品,加水制成每1ml中含20mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为6.0~7.5。溶液的澄清度与颜色取本品5份,各0.60g,分别加水10ml使溶解,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液(通则0902第一法)比较,均不得更浓;如显色,与黄色或黄绿色3号标准比色液(通则0901第一法)比较,均不得更深有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制。溶剂取磷酸二氢钠7.8g,加水溶解并稀释至900ml,用lmol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.4,用水稀释成1000ml。供试品溶液取本品适量,精密称定,加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含羧苄西林3mg的溶液。对照品溶液取青霉素对照品适量,精密称定,加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含90μg的溶液。灵敏度溶液精密量取对照品溶液适量,用溶剂定量稀释制成每1ml中约含3.0μg的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.lmol/L磷酸二氢钠溶液(用1mol/L磷酸溶液或1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至4.3)乙腈(92:8)为流动相A,以0.lmol/L磷酸二氢钠溶液(用lmol/L磷酸溶液或1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至4.3)-乙腈(60:40)为流动相B,先以流动相A等度洗脱,待羧苄西林洗脱完毕后立即按下表进行线性梯度洗脱;检测波长为230nm;流速为每分钟1.0ml进样体积20时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)100100系统适用性要求羧苄西林峰的保留时间约为20分钟,与相邻杂质峰的分离度应符合要求。灵敏度溶液色谱图中,主成分峰高的信噪比应大于10测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,按外标法以青霉素峰面积计算,青霉素的量不得过5.0%,其他单个杂质的量不得过3.0%,其他各杂质的总量不得过6.0%,小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计羧苄西林聚合物照分子排阻色谱法(通则0514)测定。临用新制,供试品溶液取本品适量(约相当于羧苄西林0.2g),精密称定,置10m1量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀对照溶液取本品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含羧苄西林30g的溶液。系统适用性溶液(1)取蓝色葡聚糖2000适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液系统适用性溶液(2)取羧苄西林钠约0.2g,置10ml量瓶中,加水4ml使溶解后,加0.2mg/ml的蓝色葡聚糖2000溶液5ml,用水稀释至刻度,摇匀。色谱条件用葡聚糖凝胶G10(40~120μm)为填充剂;玻璃柱内径1.0~1.6cm,柱高度30~40cm;以pH8.0磷酸盐缓冲液[0.05mol/L磷酸氢二钠溶液0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(95:5)]为流动相A,以水为流动相B;流速约为每分钟1.5ml;检测波长为254nm;进样体积100~2001l系统适用性要求系统适用性溶液(1)分别在以流动相A与流动相B为流动相记录的色谱图中,按蓝色葡聚糖2000峰计算,理论板数均不低于400,拖尾因子均应小于2.0,蓝色葡聚糖2000峰的保留时间的比值应在0.93~1.07之间。系统适用性溶液(2)在以流动相A为流动相记录的色谱图中,高聚体的峰高与单体和高聚体间的谷高比应大于2.0。对照溶液色谱图中主峰与供试品溶液色谱图中聚合物峰,与相应色谱系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间的比值均应在0.93~1.07之间。以流动相B为流动相,精密量取对照溶液连续进样5次,峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%。测定法以流动相A为流动相,精密量取供试品溶液注入液相色谱仪,记录色谱图;以流动相B为流动相,精密量取对照溶液注人液相色谱仪,记录色谱图。限度按外标法以羧苄西林峰面积计算,羧苄西林聚合物的量不得过1.2%残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含40mg的溶液。对照品溶液分别取乙酸乙酯与丙酮适量,精密称定,用水定量稀释制成每1m中分别约含50pg的溶液色谱条件以6%氰丙基苯基94%二甲基硅氧烷(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱;柱温为45℃;进样口温度为150℃;检测器温度为250℃;进样体积1pl系统适用性要求对照品溶液色谱图中,各主峰间的分离度均应符合要求。测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入气相色谱仪,记录色谱图。限度按外标法以峰面积计算,乙酸乙酯与丙酮的残留量均应符合规定水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分不得过5.0%可见异物取本品5份,每份各2.0g,分别加微粒检查用水制成每1ml中约含0.lg的溶液,依法检查(通则0904),应符合规定。(供无菌分装用)不溶性微粒取本品4份,分别加微粒检查用水制成每1ml中含50mg的溶液,依法检查(通则0903),每1g样品中,含10m及10m以上的微粒不得过6000粒,含25pm及 25m以上的微粒不得过600粒。(供无菌分装用)热原取本品,加灭菌注射用水制成每1ml中含羧苄西林100mg的溶液,依法检查(通则1142),剂量按家兔体重每lkg注射1ml,应符合规定。(供注射用)无菌取本品,用0.9%无菌氯化钠溶液溶解并稀释制成每1ml中约含羧苄西林40mg的溶液,经薄膜过滤法处理,用0.1%无菌蛋白胨水溶液分次冲洗(每膜不少于500ml),以大肠埃希菌为阳性对照菌,每管培养基中加入不少于200万单位的青霉素酶,依法检查(通则1101),应符合规定。(供无菌分装用)
