重组质粒双酶切鉴定
既然你的质粒已经提出来了，那么感受态、转化等因素就不必再考虑了。
你看看双酶切后载体的位置有几条带，如果是两条，那说明酶切不完全，如果是一条，那说明酶切效率没问题。
pET28a分子量为5.6k，你的插入片段为500bp，如果你的质粒完全切开，载体和插入片段的摩尔比为1：1，质量比就是5.6k：0.5k，跑胶后两条带的亮度比就是10:1，所以你目的条带很淡非常正常。
换句话说，你的实验一切正常，那条500bp的条带可能本来就应该那么淡。
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既然你的质粒已经提出来了，那么感受态、转化等因素就不必再考虑了。
你看看双酶切后载体的位置有几条带，如果是两条，那说明酶切不完全，如果是一条，那说明酶切效率没问题。
pET28a分子量为5.6k，你的插入片段为500bp，如果你的质粒完全切开，载体和插入片段的摩尔比为1：1，质量比就是5.6k：0.5k，跑胶后两条带的亮度比就是10:1，所以你目的条带很淡非常正常。
换句话说，你的实验一切正常，那条500bp的条带可能本来就应该那么淡。
