pcr产物没有纯化能够直接进行双酶切吗
PCR产物经PCR纯化试剂盒纯化后，可以做EcoRI和BamHI的双酶切。酶切、纯化都可以用PCR纯化试剂盒完成，只有一种情况例外，PCR模板为质粒，且这个质粒和要用的载体有相同的抗性。此时需要跑一次胶来丢掉模板质粒，否则在连接产物转化的平板上长出的菌落许多是模板质粒，而不是你所构建的质粒。
PCR产物不经纯化也可以直接酶切，但也很麻烦，效果可能不会很好，可能需要添加其他东西（亚精胺，限制性内切酶缓冲液，BSA等）来完成酶切。
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PCR产物经PCR纯化试剂盒纯化后，可以做EcoRI和BamHI的双酶切。酶切、纯化都可以用PCR纯化试剂盒完成，只有一种情况例外，PCR模板为质粒，且这个质粒和要用的载体有相同的抗性。此时需要跑一次胶来丢掉模板质粒，否则在连接产物转化的平板上长出的菌落许多是模板质粒，而不是你所构建的质粒。
PCR产物不经纯化也可以直接酶切，但也很麻烦，效果可能不会很好，可能需要添加其他东西（亚精胺，限制性内切酶缓冲液，BSA等）来完成酶切。
