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植物染色质免疫沉淀试剂盒的使用说明

2020.6.01

EpiQuik™植物染色质免疫沉淀试剂盒包括全套的试剂,允许试验者有效地在体内研究蛋白-DNA相互关系。整个过程可以在6小时内完成,产品效果远远优于任何竞争对手的试剂盒。EpiQuik™植物染色质免疫沉淀试剂盒适用于将特异性免疫沉淀与定性和定量PCR、ChIP-Seq、ChIP-on-chip结合使用。

这试剂盒具有如下优点:  

快速和简单的程序,实验能在6小时内完成。

微孔板的形式使得分析灵活:手动或高通量。

包括DNA纯化柱:节省时间和减少劳动力。

与所有的DNA扩增方法兼容。

能达到简单、可靠和一致的检测条件。

背景信息:

蛋白质-DNA相互作用在细胞功能,如信号转导,基因转录,染色体分离,基因复制和重组,和表观遗传沉默中发挥了关键作用。在植物中,DNA结合蛋白和同源启动子序列之间的相互作用建立了基因的时间和空间的表达模式,并影响了体内的平衡,发育和适应性。染色质免疫沉淀(ChIP)识别特定的调节蛋白及其靶基因的全基因组关联之间的直接提供了一个有利的工具。不像其他的方法如EMASA,DNA微阵列,报告基因检测,是在体外分析DNA和蛋白质的相互作用,染色质免疫沉淀(ChIP)可以在活细胞中检测特定蛋白结合到一个特定的基因序列。

程序:

该试剂盒包括从植物细胞中成功实施染色质免疫沉淀所需要的所有试剂。特别是,该试剂盒包括一个ChIP级二甲基组蛋白H3-K9抗体和正常小鼠IgG的阴性对照。从细胞染色质提取,剪切,添加到抗体封闭的微孔中。抗体捕获蛋白质-DNA复合物后DNA被释放,反转后通过特异设计的快速离心柱纯化。洗脱下来的DNA可用于各种下游应用。

起始材料:

起始材料可包括各种植物组织(花、叶、幼苗)。在一般情况下,每个反应输入量应该是从20到50毫克的植物组织。

Fig. 1. Schematic procedure of the EpiQuik™ Plant ChIP Kit.

Fig2.DNA was immunoprecipitated from 2-week-old icu2-1/icu2-1 seedlings. PCR was used to amplify the ORNITHINE TRANSCARBAMILASE (OTC) gene and regions of the AGAMOUS gene.

 


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