高效液相色谱法测定食品的甜味剂
糖精钠俗称糖精,是广泛使用的一种人工甜味剂,常用食品如酱菜、冰淇淋、蜜饯、糕点、饼干、面包等均可以糖精钠作甜味剂,以提高其甜度。糖精钠的定量分析方法有高效液相色谱法、薄层色谱法、离子选择电极法及紫外分光光度法等。目前使用较多的是高效液相色谱法。
1、测定原理
试样加温除去二氧化碳和乙醇,调pH至近中性,过滤后进高效液相色谱仪,经反相色谱分离后,根据保留时间和峰面积进行定性和定量。
2、试剂
①甲醇 经0.5μm滤膜过滤。
②氨水(1+1) 氨水加等体积水混合。
③乙酸铵溶液(0.02mol/L) 称取1.54g乙酸铵,加水至1000mL溶解,经0.45μm滤膜过滤。
④糖精钠标准储备溶液 准确称取0.0851g经120℃烘干4h后的糖精钠(C6H4CONNaSO2 • 2H2O),加水溶解定容至100.0mL。糖精钠含量1.0mg/mL,作为储备溶液。
⑤糖精钠标准使用溶液 吸取糖精钠标准储备液10.0mL放入100mL容量瓶中,加水至刻度。经0.45μm滤膜过滤。该溶液每毫升相当于0.10mg的糖精钠。
3、仪器
高效液相色谱仪,紫外检测器。
4、分析步骤
(1)样品处理
①汽水 称取5.00～10.00g,放入小烧杯中,微温搅拌除去二氧化碳,用氨水(1+1)调pH约7。加水定容至适当的体积,经0.45μm滤膜过滤。
②果汁类 称取5.00～10.00g,用氨水(1+1)调pH约7,加水定容至适当的体积,离心沉淀,上清液经0.45μm滤膜过滤。
③配制酒类 称取10.0g,放小烧杯中,水浴加热除去乙醇,用氨水(1+1)调pH约7,加水定容至20mL,经0.45μm滤膜过滤。
(2)高效液相色谱参考条件
①色谱柱 YWG-C184.6mm×250mm 10μm不锈钢柱。
②流动相 甲醇-乙酸铵溶液(0.02mol/L)(5+95)。
③流速 1mL/min。
④检测器 紫外检测器,波长230nm,灵敏度0.2AUFS。
(3)测定 取样品处理液和标准使用液各10μL(或相同体积)注入高效液相色谱仪进行分离,以其标准溶液峰的保留时间为依据进行定性,以其峰面积求出样液中被测物质的含量,供计算。
5、结果计算
式中 X1——样品中糖精钠含量,g/kg;
m1——进样体积中糖精钠的质量,mg;
V2——进样体积,mL;
V1——样品稀释液总体积,mL;
m2——样品质量,g。
6、讨论
①高效液相色谱法取样量为10g,进样量为10μL时,最低检出量为1.5ng。
②允许差:相对相差≤10%。
③本方法糖精钠回收率为90%～110%。
④用此高效液相分离条件可以同时测定糖精钠、苯甲酸和山梨酸。
⑤山梨酸的波长为245nm,在此波长下测苯甲酸、糖精钠灵敏度较低,苯甲酸。
⑥在本实验条件下,苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间依、糖精钠灵敏度波长为230nm。考虑到三种被测组分的灵敏度,采用波长为230nm依次为3.88min,4.70min,7.27min。
⑦所用的移动相中甲醇的量根据不同规格的柱可以作改变,一般在5%～7%之间变化。
-
仪器推荐
-
仪器推荐
-
仪器推荐
-
仪器推荐
-
仪器推荐
询底价 Tel：400-6699-117 转 2000
