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尿激酶的效价测定介绍

2022.8.01

  1、酶活力

  (1)试剂 牛纤维蛋白原溶液取牛纤维蛋白原,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝结蛋白的溶液。

  牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0单位的溶液。

  牛纤维蛋白溶酶原溶液 取牛纤维蛋白溶酶原,加三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH 9.0)制成每1ml中含1~1.4酪蛋白单位的溶液(如溶液浑浊,离心,取上清液备用)。

  混合溶液 临用前取等体积的牛凝血酶溶液和牛纤维蛋白溶酶原溶液,混匀。

  (2)标准品溶液的制备 取尿激酶标准品,加巴比妥-氯化钠缓冲液(pH 7.8)溶解并定量稀释制成每1ml中含60单位的溶液。

  (3)供试品溶液的制备 取本品适量,加巴比妥-氯化钠缓冲液(pH 7.8)溶解,混匀,并定量稀释成与标准品溶液相同的浓度。

  (4)测定法 取试管4支,各加牛纤维蛋白原溶液0.3ml,置37℃±0.5℃水浴中,分别加入巴比妥-氯化钠缓冲液(pH 7.8)0.9ml、0.8ml、0.7ml、0.6ml,依次加标准品溶液0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml,再分别加混合溶液0.4ml,立即摇匀,分别计时。反应系统应在30~40秒内凝结,当凝块内小气泡上升到反应系统体积一半时作为反应终点,立即记时。每种浓度测3次,求平均值(3次测定中最大值与最小值的差不得超过平均值的10%)。以尿激酶浓度的对数为横坐标,以反应终点时间的对数为纵坐标,进行线性回归。供试品按上法测定,用线性回归方程求得效价,计算每1mg中供试品的效价(单位)。

  2、蛋白质含量

  取本品约10mg,精密称定,照蛋白质含量测定法(2010年版药典二部附录Ⅶ M第一法)测定,即得。

  3、比活

  每1mg蛋白中含尿激酶活力单位数。

  类别

  溶栓药。

  贮藏

  遮光,密封,在10℃以下保存。

  制剂

  注射用尿激酶

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