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牛乳中细菌的检查实验

2020.8.18

实验方法原理

实验材料 生牛乳 10 ml

仪器、耗材 10 ul 微量吸液器与吸嘴载玻片美蓝染液(Levowitz-Weber 染料)缶显微镜水浴锅试管架吸水纸

实验步骤

1. 在白纸上画出 1 cm2 的方块,然后将玻片放在纸上。

2. 用 10 ul 的微量吸液器吸取混匀了的生牛乳样品,放在玻片 1 cm2 区域的中央。

3. 用接种针将牛乳涂匀,并涂满 1 cm2 的范围。

4. 使涂片于空气中慢慢干燥。将铁丝试管架放在沸水浴中,然后置已干燥的涂片于试管架上,用蒸汽热固定 5 min,待干。

5. 浸于美蓝染液缶内染色 2 min。

6. 取出玻片,用吸水纸吸去多余的染料,晾干。

7. 再用水缓缓冲洗,晾干。

8. 油镜下观察细菌数,共数 30~50 个视野。

9. 计算

每毫升的细菌总数=平均每视野的细菌数×500 000

因为:

一般油镜的视野直径为 0.16 mm

一个视野的面积=0.082 × 3.1416=0.02 mm2 ,化成 cm2 ,视野面积=0.02 × 0.01=0.0002 cm2 ,1 cm2 的视野数=1.0 ÷ 0.0002=5000

又因每 1 cm2 的牛乳量为 0.01 ml,即 1/100 ml,

则每一视野的牛乳量=1/100×1/5 000=1/500 000 ml

所以,一个视野中的 1 个细菌就代表 1 ml 牛乳中有 500 000 个细菌。因此 1 ml 牛乳中的细菌数=一个视野的细菌数×500 000= 50 个视野的细菌数 ÷ 50×500 000

 


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