吉凯基因Dr.L的私家实验笔记——稳定株
1、什么是瞬时表达和稳定表达？
课前热身，了解的同学请直接进入题2
瞬时表达：外源片段不能随细胞分裂而一同复制，导致表达时间短暂，且表达量随时间逐渐下降。
稳定表达：是指外源片段整合入细胞基因组中，并能随细胞分裂稳定传递下去，表达量长时间处于稳定水平。
那稳定株，顾名思义当然是属于稳定表达的体系了。
2、我的实验是否需要筛选稳定株？
能够达到稳定表达的方法不止稳定株一种哦。我们使用慢病毒感染细胞，也一样可以达到稳定表达的效果。什么原理呢？
*慢病毒是整合型的逆转录病毒载体，感染细胞后，携带的外源片段会直接整合入细胞的基因组DNA中，并能够随细胞分裂稳定传代。所以对于大多数实验，包括细胞周期、凋亡、增殖等功能学实验，甚至裸鼠成瘤等长时间的实验，只要细胞感染效率较高（70%～80%以上），感染一次慢病毒就可以达到长时间、高效的基因操作的目的，满足实验要求，无须筛选稳定细胞株。
3、细胞感染效率较高（70%～80%以上），臣妾做不到啊，难感染的细胞怎么办？
少年，恭喜你选择了hard模式。那就赶紧召唤稳定株吧。那么问题来了，选择何种方式将外源片段整合入细胞基因组中呢？
质粒（常规转染/电转）：这种方法介导的整合几率和中500w彩票差不多哦
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