做miRNA的PCR的方法介绍
加尾法和茎环法
加尾法，是指把miRNA再人工加一个polyA的尾巴，这样它的结构就变长，有点象是典型的mRNA结构。很多公司提供有现成的miRNA加尾法逆转录试剂盒。按常规方法提取总RNA，用于逆转录。做完逆转录后，可参考的方法去做PCR。注意，这时的PCR需要的上下游引物，一般是上游引物就直接用miRNA的序列（把U换成T即可），下游引物则要参考逆转录试剂盒的加尾，一般由逆转录试剂盒的同家公司特殊提供。
茎环法也是一种很常见的方法。它是模拟miRNA在形成过程中的茎环结构（Stem Loop），在逆转录过程中把miRNA成熟体序列加长，同时其序列内部互相配对形成茎环结构。
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