左氧氟沙星的检查及鉴别方法
鉴别
(1)取本品与氧氟沙星对照品适量,分别加右氧氟沙星项下的流动相溶解并稀释制成每1m中含0.01mg与0.02mg的溶液,作为供试品溶液与对照品溶液。照右氧氟沙星项下的方法试验,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰中左氧氟沙星峰(后)的保留时间一致。(2)取本品适量,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含5gg的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401)测定,在226nm与294nm的波长处有最大吸收,在263nm的波长处有最小吸收。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集1128)一致
检查
酸碱度取本品,加水制成每1m中含10mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为6.8~8.0。溶液的澄清度取本品5份,分别加水制成每1m1中含5mg的溶液,溶液均应澄清;如显浑浊,与2号浊度标准液(通则0902第一法)比较,均不得更浓吸光度取本品5份,分别加水溶解并定量稀释制成每lml中含5mg的溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在450nm波长处测定吸光度,均不得过0.1。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品,精密称定,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含1.0mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液适量,用0.1molL盐酸溶液定量稀释制成每1m中约含2μg的溶液,杂质A对照品溶液取杂质A对照品约15mg,精密称定,置10oml量瓶中,加6mol/L氨溶液1m与水适量使溶解,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。系统适用性溶液取左氧氟沙星对照品、环丙沙星对照品和杂质E对照品各适量,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含左氧氟沙星1.0mg、环丙沙星和杂质E各5g的混合溶液灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用0.1molI盐酸溶液定量稀释制成每1m中约含0.2μg的溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以醋酸铵高氯酸钠溶液(取醋酸铵4.0g和高氯酸钠7.0g,加水1300ml使溶解,用磷酸调节pH值至2.2)-乙腈(85:15)为流动相A,乙腈为流动相B,按下表进行线性梯度洗脱;流速为每分钟ml;柱温为40℃;检测波长为294mm和238nm;进样体积10pl时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)100系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中(294nm)左氧氟沙星峰的保留时间约为15分钟,左氧氟沙星峰与杂质E峰和左氧氟沙星峰与环丙沙星峰之间的分离度应分别大于2.0与2.5。灵敏度溶液色谱图中(294mm),主成分色谱峰峰高的信噪比应大于10测定法精密量取供试品溶液、对照溶液和杂质A对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,杂质A(238nm)按外标法以峰面积计算,不得过0.3%,其他单个杂质(294nm)峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.2%),其他各杂质(294mm)峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍(0.5%),小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计。右氧氟沙星照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含1.0mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含10Pg的溶液。系统适用性溶液取左氧氟沙星和氧氟沙星对照品各适量,加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含左氧氟沙星1mg和氧氟沙星20μg的溶液。灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含0.5g的溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以硫酸铜D苯丙氨酸溶液(取D苯丙氨酸1.32g与硫酸铜1g,加水o0oml溶解后,用氢氧化钠试液调节pH值至3.5)-甲醇(82:18)为流动相;柱温为40℃,检测波长为294nm;进样体积为20l系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,右氧氟沙星与左氧氟沙星依次流出,右、左旋异构体峰之间的分离度应符合要求。灵敏度溶液色谱图中,主成分色谱峰峰高的信噪比应大于10。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中右氧氟沙星峰面积不得大于对照溶液主峰面积(1.0%)。残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861第一法)测定。内标溶液称取丙酮适量,用0.5mol/L盐酸溶液稀释制成每1ml中含0.01mg的溶液供试品溶液取本品适量,精密称定,加内标溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含100mg的溶液,精密量取5ml,置顶空瓶中,密封对照品溶液取甲醇和乙醇,精密称定,用内标溶液定量稀释制成每1ml中含甲醇和乙醇分别为300g和500gg的溶液,精密量取5ml,置顶空瓶中,密封。色谱条件以聚乙二醇(PEG20M)(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱;柱温为40℃;进样口温度为150℃;检测器温度为180℃;顶空瓶平衡温度为85℃,平衡时间为30分钟。系统适用性要求对照品溶液色谱图中,丙酮峰、甲醇峰 与乙醇峰间的分离度均应符合要求测定法取供试品溶液与对照品溶液,分别顶空进样,记录色谱图。按内标法以峰面积比值计算限度甲醇与乙醇的残留量均应符合规定水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法)测定,含水分应为20%~3.0%。炽灼残渣取本品1g,置铂坩埚中,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.1%。重金属取炽灼残渣项下的遗留残渣,依法检查(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之十
