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中性粒细胞吞噬功能的测定

2019.4.05

中性粒细胞吞噬功能的测定可用于:(1)检测机体吞噬功能;(2)诊断吞噬细胞功能障碍相关的疾病。

实验方法原理中性粒细胞是外周血循环和免疫系统中含量最丰富的免疫细胞,具有变形与吞噬能力,在抵抗疾病和保护机体方面起着非常重要的作用。中性粒细胞可以黏附于大静脉内皮细胞表面,在感染和应激时可被快速动员。具有趋化、吞噬和杀菌等多种生物学功能,是机体固有免疫系统的重要组成部分。将白细胞悬液与细菌混合一段时间后,取样涂片染色镜检,可以测定中性粒细胞吞噬百分率和吞噬指数,判断中性粒细胞的吞噬功能。
实验材料

金黄色葡萄球菌(悬液)

试剂、试剂盒

肉汤培养基硷性美蓝液生理盐水甲醇抗凝剂(3.8%枸橼酸钠)

仪器、耗材

培养箱水浴锅血红蛋白吸管玻片小试管载玻片采血针酒精棉球

实验步骤

一、操作方法


1. 取小试管1支,加入3.8%枸橼酸钠溶液1滴(0.4 ml)。


2. 酒精棉球消毒手指和采血针,消毒部位取血2~3滴(约0.2 ml)加入小试管,混匀。


3. 取菌液1滴(约0.1ml)加入小试管,吹吸混匀。


4. 置37℃水浴锅15min,中途混匀1次。


5. 取出小试管,用吸管将试管中混合血液打匀后,取血半滴于载玻片上,用另一载玻片推成薄血片。


6. 载玻片静置,待血片自干后,瑞氏染色法染色。


二、结果分析


吞噬细胞%=即100个中性粒细胞中吞噬有细菌的细胞数;


吞噬指数=将100个中性粒细胞所吞噬的细菌总数除以100,得到每个白细胞吞噬细菌的平均数,即为吞噬指数。

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注意事项

1. 由于不同标本的个体差异及年龄和健康状况不同,吞噬能力有差别。


2. 涂血片时不宜过厚,否则不易观察结果。


3. 本实验属于活菌实验,注意无菌操作,注意个体生物安全。


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