非同位素分析报道基因活性实验
萤火虫荧光素酶法
冻融裂解的细胞的荧光素酶分析
β-半乳糖苷酶报道基因的化学发光分析
| 实验材料 | 转染细胞 |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | PBS 荧光素贮液 Triton 甘氨酰甘氨酸 |
| 仪器、耗材 | 橡胶细胞刮子 绘图仪 比色杯 |
| 实验步骤 |
1. 用冰冷的PBS洗涤在3个60 mm 培养皿中的转染了荧光素酶表达质粒的细胞各3次， 毎次用4 ml PBS洗后吸去洗液。
2. 每个培养皿中加入350 μl Triton/甘氨酰甘氨酸裂解液。用橡皮刮子刮下细胞，将溶解的细胞转入1.5 ml 微量离心管中。4℃以最大速度微量离心5 min。将上清（细胞裂解液）转入一个干净的微量离心管中，置于冰上以备分析。
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