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体细胞杂交的实验原理介绍

2022.3.17

  不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合,所产生的杂种细胞,即异核体经过培养可再生新壁,分裂形成愈伤组织,进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞,故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组,因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究中也是关键技术之一。

  人工诱导原生质体融合可使用物理学方法,如运用细胞融合仪,在电场诱因导下实现融合,然而至今广为使用的仍是聚乙二醇(PEG)溶液引起原生质体的聚集和粘连,然后用高pH钙溶液相处理的化学方法(Kao等,1974)。该法应用分子量至为1500~6000的聚乙二醇(PEG)溶液引起原生质体的聚集和粘连,然后用高pH的钙溶液稀释时,就产生了高频率的融合,融合的频率和省略常与所有PEG的分子量、浓度,作用时间,原生质体的生理状态与密度以及操作者的细心程度有关。

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