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植物体细胞杂交的过程介绍

2022.3.09

  将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理,得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B,运用物理方法或是化学方法诱导融合,形成杂种细胞,再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。

  ①杂交时间:植物细胞杂交是从细胞融合开始,到培育成的新植物体结束。

  a.原生质体制备:用酶解法去除细胞壁(纤维素酶和果胶酶)

  b.原生质体融合:膜融合(高钙、高pH诱导融合)、核融合(杂种细胞第一次有丝分裂时融合)

  PEG诱导融合的特点:其优点是融合成本低,勿需特殊设备;融合子产生的异核率较

  高;融合过程不受物种限制。其缺点是融合过程繁琐,PEG可能对细胞有毒害。

  PEG的作用机理: Kao等认为,由于PEG分子具有轻微的负极性,故可以与具有正极

  性基团的水、蛋白质和碳水化合物等形成H键,从而在原生质体之间形成分子桥,其

  结果是使原生质体发生粘连进而促使原生质体的融合;另外,PEG能增加类脂膜的流动

  性,也使原生质体的核、细胞器发生融合成为可能。

 

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