典型CASE分享 蛋白产品常见翻译后修饰（PTM）
翻译后修饰（PTM）是指蛋白质在翻译后发生的化学修饰。抗体在生产、贮存及临床使用过程中，均可能产生各类翻译后修饰变异体。翻译后修饰可能导致抗体所带的电荷乃至结构发生变化，从而影响其与抗原及Fc受体的亲和力，进而影响抗体药物的活性等关键质量属性。因此，对抗体药物的各类翻译后修饰进行表征和工艺控制是有必要的。本文以抗体药物常见的糖基化修饰、天冬酰胺脱氨基修饰和天冬氨酸异构化修饰、氧化修饰、C-末端赖氨酸缺失修饰、N-末端焦谷氨酸环化修饰等为例对各类翻译后修饰做简要介绍。
糖基化修饰
氧化修饰
天冬酰胺脱氨基修饰和天冬氨酸异构化修饰
C-末端赖氨酸缺失修饰
人IgG抗体重链的C-末端多以-Pro-Gly-Lys结尾，在抗体生物合成及分泌过程中，C-末端赖氨酸会被细胞内外的羧肽酶综合作用而切除，但这种切除作用并不是完全的，从而出现赖氨酸残留的情况。C-末端赖氨酸变体是导致抗体电荷异质性的主要原因。不同数目的赖氨酸残留使抗体带有不同的净电荷，这种因赖氨酸切除导致的电荷差异而形成的变体称为赖氨酸变体。
单克隆抗体大规模生产时，赖氨酸变体应控制在合理范围内，并评估是否需作为在产品放行、稳定性试验和工艺改变时的一项检测指标。
N-末端焦谷氨酸环化修饰
参考文献
Katrine T. Schjoldager, Yoshiki Narimatsu, Hiren J. Joshi, et al. Global view of human protein glycosylation pathways and functions. Nat Rev Mol Cell Biol, 21, 729–749 (2020).
Alain Beck, Elsa Wagner-Rousset, Daniel Ayoub, et al. Characterization of therapeutic antibodies and related products. Anal Chem, 85, 715-736 (2013).
Yi Du, Alison Walsh, Robin Ehrick, Wei Xu, et al. Chromatographic analysis of the acidic and basic species of recombinant monoclonal antibodies, mAbs, 4, 578-585 (2012).
