关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

乳腺腺癌细胞系SK-BR-3的传代方法

2020.9.14

刚开始养SK-BR-3时,细胞状态不是很好,贴壁也不均匀,于是开始想办法,考虑是不是吹打的不够,或是传得过多,或是其它的什么,后来发现的确如此,细胞的生长状态与传代的方法有很密切的联系。

我的传代方法是:

以50平方厘米培养瓶为例,待细胞长满瓶底70%-80%

1 、吸除或倒掉瓶内旧培养基。

2 、PBS 5ml加入培养瓶,轻轻晃动培养瓶,让PBS流遍细胞表面,倒掉。

3 、PBS 5ml加入培养瓶重复洗一次,倒掉。

4 、加入1ml胰蛋白酶消化液,轻轻摇动培养瓶,使消化液流遍所有细胞表面,然后置37度5%的二氧化碳培养箱放置5分钟,在显微镜下观察,发现细胞脱壁、变圆即可。

5、 加入含血清的培养基5ml中止消化,吸取瓶内培养液,反复轻轻吹打瓶壁细胞,确保所有的瓶底都要吹打到。


6、 吸1/3至1/4的细胞悬液接种至新的培养瓶,然后加8ml的新的细胞培养基,置37度5%的二氧化碳培养箱完成传代。


推荐
热点排行
一周推荐
关闭