流式细胞术数据分析知识汇总（二）
5、常见荧光素
根据激光及滤光片选取流式抗体染料
6、常见的荧光素染料组合
7、举例：
8、双或多参数荧光抗体的标记组合
1）单染
2）双或多染
9、流式主要实验对照及作用：
空白对照（未染色细胞）：用以区分细胞的自发荧光和特异性荧光，避免假阳性的结果。
同型对照：使用与实验抗体相同种属来源、相同剂量及同种免疫球蛋白的相同亚型的抗体作为对照，用于消除抗体非特异性结合到细胞上而产生的背景荧光。
10、阴性/阳性的区分？
对于流式样本，由于细胞的自发荧光、荧光抗体会与待测标本中的细胞发生少量非特异性结合，在流式细胞仪上可检出一定的信号，这部分信号称为基础荧光阈值。
在流式标本检测的过程中，通常通过调节电压将阴性细胞的基础荧光域值于95%或99%的置信区间内，作为阴性对照可信区间设定。大于阴性置信区间的荧光信号为特异性荧光信号。
注意：流式图中的颜色为区分不同细胞群而人为设定，与荧光无关
1）红色线：空白对照；
2）绿色线：阴性（同型）对照，（P2区域即为阴性区域）
3）蓝色线为实验组。
第二章 FCM数据分析（总）
1、单参数直方图
以分布直方图来显示，横轴为该参数测量强度的相对值，单位是道数，可以是线形或者对数。纵轴一般是相对细胞/粒子数。
横轴：参数测量强度的相对值；
纵轴：相对细胞（粒子）数
细胞DNA含量的检测（细胞周期分析）
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