琼脂扩散实验——双向琼脂扩散
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 取一清洁载玻片,倾注3.5~4.0毫升加热熔化的1%食盐琼脂制成琼脂板。
图2 双向琼脂扩散原抗体孔位置示意图 3. 用微量进样器于中央孔加抗体,于周围孔加各种抗原。加样时勿使样品外溢或在边缘残存小气泡,以免影响扩散结果。
图3 双扩散试验结果示意图 A:已知抗体 a、b:阳性对照 c、d、e、f:被检材料 (2)抗原浓度与沉淀先导形状的关系:两相邻抗原浓度相同,形成对称相融合的沉淀线;如果两抗原浓度不同,则沉淀线不对称,移向低浓度的一边。见图4。 图4 抗原特异性与沉淀线形状的关系 a、b:抗体 A、A’、B:抗原 A、B完全不同 A、A’部分相同 (3)温度对沉淀线的影响:在一定范围内,温度扩散快。通常反应在0~37℃下进行。在双向扩散时,为了减少沉淀线变形并保持其清晰度,可在37℃下形成沉淀线,然后置于室温或冰箱(4℃)中为佳。
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