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琼脂扩散实验——单向琼脂扩散

2019.4.06
实验材料

待检血清

试剂、试剂盒

生理盐水琼脂粉

仪器、耗材

微量进样器打孔器玻璃板湿盒

实验步骤

1.  将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。


2.  在免疫琼脂板上按一定距离(1.2~1.5厘米)打孔,见图1。

图1  单向琼脂扩散试验抗原孔位置示意图

1~5孔加参考血清,6~7孔加待检血清

 

3.  向孔内滴加1:2,1:4,1:8,1:16,1:32稀释的参考血清及1:10稀释的待检血清,每孔10微升,此时加入的抗原液面应与琼脂板一平,不得外溢。


4.  已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时。


5.  测定各孔形成的沉淀环直径(mm),用参考血清各稀释度测定值绘出标准曲线,再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。

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