蛋白酶的测定实验——偶氮酪蛋白测定法
实验方法原理 | 酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断,用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液 0.2 ml 蛋白酶溶液 25℃ 时培养 30 min 后,加 0.2 ml 10% 三氯乙酸停止反应,离心 5 min。 于 340 nm 处测上清液的吸收值,1U 是指 1 h 内,能使吸收值变化 1 的酶量。 |
注意事项 | |
其他 | 试剂: 0.1 mol/L 磷酸钾,pH 8.0 0.2% 偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)溶于 0.1 mol/L 磷酸钾溶液,pH 8.0 10% 三氯乙酸(TCA,质量浓度) 展 |
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