DNA测序实验怎么做
历史是 Rober Holley，1965年发表于Science杂志上的文章报道了酵母丙氨酸tRNA序列，77碱基。 吴瑞博士（Dr. Ray Wu）提出引物-延伸的测序策略。1971年首次成功的测定了λ噬菌体的两个粘性末端。 F.Sanger，1977年，发表在Nature和PNAS上的文章描述了双脱氧链终止法。诺贝尔奖获得者。 A.M.Maxam和W.Gilbert，1977年，化学法测序。 双脱氧链终止法测序（又称酶法，Sanger测序方法）： 对DNA进行体外合成时，将ddNTP与dNTP按一定的比例混合就可以得到一组大小不同、按照模板序列终止的DNA片段 如果引物是带有标记的，在变性凝胶上做电泳分离，通过放射自显影技术就可以检测单链DNA片段，并进行认读 化学法DNA测序（又称Maxam-Gilbert法） 是一个DNA化学降解的过程，而不是生物合成过程。 化学试剂处理具有末端标记的DNA片段，造成碱基的特异性切割，由此产生一组具有各种不同长度的DNA链的反应混合物。 经凝胶电泳按大小分离和放射自显影后，根据X光片所显现的相应条带，直接读出待测DNA片段的核苷酸顺序。 PS:呵呵，我是说的最主要的小片段测序法，如果要是测比较大的序列，像人类基因组那类，我记得听杨焕明教授说他们是用的鸟枪法，呵呵，要针对具体的实验去选择方法
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