用酸沉淀法浓缩蛋白质实验——丙酮沉淀法
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 加 1 ml冷丙酮(-20℃)至 200 ul 样品溶液,混匀。 2. -20℃: 放置 10 min。 3. 小型台式离心机离心 5 min。 4. 弃去上清液,使沉淀风干。 5. 于 1~2 倍沉淀体积的缓冲液中再悬浮沉淀。 |
注意事项 | 1. 反复用丙酮洗涤和沉淀蛋白质 。 2. 通过延长 -20℃ 的放置时间,达 2 h 以上,再用 27 000 × g 离心 10 min,可以定量沉淀小于 1 ug 蛋白质。 3. 中性盐提高蛋白质在有机溶剂中的溶解度,二价阳离子降低蛋白质在有机溶剂中的溶解度。 |
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