Cell：中药单体青蒿素治疗I型糖尿病（一）
“浅析中药与西药的异同”这篇文章中，对比了中药与西药各自的优缺点，其实中药的多靶点，协同作用好的优点是西药的缺陷，而西药的成份清楚机理明晰的优点是中药的缺陷。所以，目前研究中药，先把成份理清，机理阐明。“中药复方如何发表高分SCI”两篇文章，是从科研的角度，佐证现阶段中药有效成份研究的重要性。今年12月1日，复旦大学新药益母草碱项目转让，1.5亿元。季博在转发这条消息时说了一句话，“至少五年内，从中医药中寻找有效成份开发新药是主流。从单体回归到复方，开发分子组方新药，估计至少五年以后“。大家注意这里”主流“的范围，不仅仅是中医药研究领域，而是整个新药开发领域。今天分享的文章，是发表在老大杂志Cell上的文章，Artemisinins Target GABAα Receptor Signaling and Impair a Cell Identity. 2016. Cell。刚刚发表的文章。做的是青蒿素，新药？老药？对于化学成份药来说，是老药，临床上一直在用（从中草药中寻找新药的好处，临床一直在用，毒性作用可控）。对于适应症来说，是新药。
我们从科研的角度，来分析一下这篇文章。
先看背景，背景一般都是报道过的。
1、I型糖尿病中β细胞丧失。本文研究的细分方向是如何补充β细胞。
2、α细胞可以转化为β细胞。
3、过表达Pax4可以将α细胞转化为β细胞，在β细胞中Pax4可以抑制Arx。单独抑制Arx也可以将α细胞转化为β细胞。
4、青蒿提取物可以治疗I型糖尿病。（有两篇参考文献。）文中提出，青蒿素治疗糖尿病或者在胰岛中的作用，未见报道。不知道大家想到啥了。这就是从中草药中开发新药的思路。从临床上在用的中草药中，找有效单体，开发新药。
Figure 1. A Cell-Line Model of Transcription-Factor-Mediated Transdifferentiation for Identifying Functional ARX Inhibitors
细胞模型用的是小鼠β细胞系Min6，连cell也用细胞系来研究，胰岛原代是很难搞定的。
构建了ARX诱导型的过表达稳定株。加入DOX，ARX表达，胰岛素下降（α表型）。后面以胰岛素为检测指标（分子指标）。（为啥用诱导型的，估计是害怕长时间过表达，细胞不能从α返回β了。后面的筛药是需要把α变成β。）
采用这个稳定株为细胞模型，以胰岛素为检测指标。在DOX存在的情况下（α型），进行了HCS筛选。筛选到了青蒿素。
这里HCS是筛选药物，如果是筛选功能基因，把加药改成基因操作工具就可以了。细胞模型和检测指标都是一样的。
筛选到青蒿素后，在α细胞系αTC1细胞中进行了验证。青蒿素可以诱导αTC1细胞中胰岛素的表达。其实，前面的筛选策略，可以改成在αTC1细胞中采用胰岛素作为检测指标进行筛选，更方便。那么为啥文章用了前面的复杂策略呢，肯定有原因。文中没有明说。
到底是cell的文章，在第一幅图里面，也讨论了药物对ARX核质定位的影响，因为ARX是个转录因子。
Figure 2. Artemether Induces Insulin Expression in a Cells by Targeting Gephyrin
OK，第一幅图拿到药了，因为是功能筛选，所以药物功能就有了（药效评价-细胞实验）。下面就开始做机理了。大家注意，筛药是在Min6细胞，机理却是在αTC1细胞中探讨的。
把药物分子固定，进行pulldown实验。质谱鉴定拉下来的蛋白。找到了与青蒿素可以直接结合的蛋白，gephyrin。这里找的药物靶点，是直接靶点。其实大家看第一幅图的描述，作者也做了加药和不加药的蛋白组，寻找药物后的差异蛋白。间接靶点可以从这些差异蛋白中寻找。
接着，就进行药靶鉴定了。采用RNAi在αTC1细胞中knockdown gephyrin，发现，加入青蒿素后不能上调胰岛素的表达了。（药物与药靶相关性-功能相关性-回复实验）。到底是cell，直接上回复实验。F2D。F2E图中，加入青蒿素，gephyrin上升（药物与药靶相关性-分子相关性）。
