血涂片染色的历史与发展
血细胞染色是形态学检查的基础，其染色效果又决定了血细胞识别的质量，直接影响着血液系统疾病诊断与鉴别诊断的水平。自从全国形态学专家座谈会召开以来，迅速引起国内各实验室对形态学检验的重视，同时也注意了不断提高血细胞染色的质量。
目前应用最广泛的瑞氏-姆萨姬染色（瑞-姬染色）实际上是改良的罗曼诺夫斯基染色法。罗氏染液对不同的血细胞有不同染色能力，最初是从陈旧发霉的亚甲蓝、伊红混合液将红细胞内寄生虫的核物质染成鲜艳的紫色和染色质染成红色而发现的。这种染液的特性是在蓝色和粉红色之外产生了第3种颜色——紫色。这种效应可能是亚甲蓝的氧化产物天青B与伊红组成的一种复合物。
1984年，国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐罗曼诺夫斯基染色为参考染色法。随后国内外学者又先后又推出了快速染色法、混合染色法、改良染色法、替代染色法等。
一、经典染色法建立
俄罗斯学者罗曼诺夫斯基首创了含有亚甲蓝和伊红的罗氏染色法，并证明亚甲蓝-伊红液越陈旧其染色效果越好。罗氏染色剂是利用氧化剂氧化亚甲蓝，使之产生天青，再与伊红液混合后可立即染已固定的涂片。1901年利什曼、1902年瑞氏、1902年姬姆萨分别根据罗氏染色剂用伊红和亚甲蓝混合而成的原理，设计了3种不同特点的染色剂，并成批生产出染色粉剂，从而建立了经典染色法，并一直使用至今。
二、快速染色法兴起
经典染色法应用于临床后，由于染色时间偏长，不利于急诊检验，因此各种快速染色法先后推出。快速染色法主要有两类：两色分染法和快速促染法。市场中应用广泛的是加大磷酸盐类促染。结果显示加入甘油和磷酸盐的染色剂天青B含量明显增加，而天青B含量是提高染色效果的决定因素。以ICSH标准判断血片染色效果，加入甘油磷酸盐的染色剂明显优于常用的瑞-姬染色液。而且这种染色法试剂配制简便，染色时间短，非常适合急症和门诊血常规检验，可在临床上推广使用。
三、标准染色法推广
经典染色法和快速染色法用于临床以后，由于每个实验工作者都只习惯于本实验室的染色方法，实验室之间用不同的染色方法进行会诊时，常引起争论甚至作出不同的形态学诊断。同样，参考图谱也会出现问题，因为图谱里的插图也可能使用了不同的染色方法。不同染色法的插图甚至会误导读者。所以将染色方法标准化不仅是日常诊断工作中的需要，也是进行研究工作所需要的。为了克服不同种类染色的效果差异以及实验室间不同的染色标准，ICSH成立了血和骨髓片染色和染色方法小组，并确立了一套标准的血涂片染色方法。ICSH的专家们发现了3个基本条件可使罗曼诺夫斯基染色法的重复效果满意。(1)使用足够纯度的天青B以及伊红；(2)正确和适当的组合染料将其配制成染液；(3)1个标准的染色方法需要选定缓冲液浓度。但由于天青B提纯的费用较高，因此标准染色法在国内推广缓慢。
四、改良染色法特点
瑞氏染色对细胞质成分及中性颗粒着色好，而对细胞核的染色不如姬姆萨染色，采用瑞氏-姬姆萨复合染色液染色，兼取两者之长，可使血细胞的胞质、颗粒及胞核等获得较为满意的染色效果。实践证明，混合染色法优于单一染色法。
为了提高血片、骨髓片染色效果，国内外仍不断对染色技术加以改进，有的在染色液快速溶解方面进行了改良；有的在分化剂使用方面进行了改良；有的在血膜外形成一层液态膜方面进行了改良；也有的在微波快速染色方面进行了改良。如各种改良染色法，纸片染色法等。
五、替代染色法问世
1879年，Ehrlich首先发现普通纺织染料能用于血细胞染色，这些纺织染料可将各类血细胞染成不同颜色。KASS曾以多种纺织染料进行血细胞染色研究，效果十分理想。国内学者也先后以国产纺织染料染血和骨髓涂片，也取得了非常满意的结果。
六、血涂片染色发展前景
血细胞染色在国内使用最多的是瑞氏染色法和瑞-姬染色法。这2种染色法的天青B含量均达不到罗曼诺夫斯基染色的要求。虽然生物学染色委员会限定天青B最低含量为80%，但国内、外瑞氏染色剂中天青B的含量仍较低。
ICSH推荐的罗曼诺夫斯基染色法要求天青B纯度较高。一般认为94%的天青B可以生产，但其可溶性差，需加增溶剂，而且制作成本高，从经济实用方面考虑不太实际。因此目前多用于科学研究，尚难以在常规工作中应用。瑞-姬染色法60年的实践经验提示我们，作为经典染色技术，瑞-姬染色法通过进一步改进仍然是理想的染色法。
