硫酸阿米卡星
性状
本品为白色或类白色粉末或结晶性粉末;几乎无臭本品在水中极易溶解,在甲醇、丙酮或乙醚中几乎不溶。比旋度取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含20mg的溶液,依法测定(通则0621),比旋度为76°至+84°。
鉴别
(1)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含阿米卡星5mg的溶液对照品溶液取阿米卡星对照品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含阿米卡星5mg的溶液。系统适用性溶液取供试品溶液和对照品溶液,等量混合。色谱条件与测定法见卡那霉素项下系统适用性要求系统适用性溶液应显单一斑点结果判定供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液主斑点的位置和颜色相同。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集1079图)一致。(4)本品的水溶液显硫酸盐的鉴别反应(通则0301)以上(1)、(2)两项可选做一项。
检查
酸碱度取本品,加水制成每1ml中约含10mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为6.0~7.5(n=1.8或2.0~4.0(n=2)。溶液的澄清度与颜色取本品5份,各0.30g,分别加水5ml使溶解,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液(通则0902第一法)比较,均不得更浓;如显色,与黄色或黄绿色2号标准比色液(通则0901第一法)比较,均不得更深有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含阿米卡星5.0mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液适量,用流动相A定量稀释制成每1ml中约含阿米卡星50g的溶液。系统适用性溶液取阿米卡星对照品适量,加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含5.0mg的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Spu柱,4.6mm×250mm,5m或效能相当的色谱柱);取辛烷磺酸钠1.8g和无水硫酸钠20.0g,加pH3.0的0.2mol/L磷酸盐缓冲液(0.2mol/L磷酸二氢钾溶液,用0.2mol/L磷酸溶液调节pH值至3.0)50ml和水900ml溶解,加乙腈50ml,混匀,作为流动相A;取辛烷磺酸钠1.8g和无水硫酸钠20.0g,加pH3.0的0.2mol/L磷酸盐缓冲液50m和水850ml溶解,加乙腈100ml,混匀,作为流动相B,按下表进行线性梯度洗脱;流速为每分钟1.3ml;柱温为40℃;检测波长为200nm;进样体积10l时间(分钟)流动相A(%流动相B(%)10050系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,阿米卡星峰的保留时间应在20~30分钟之间(必要时适当调整流动相A和流动相B的比例),阿米卡星峰与杂质B峰(相对保留时间约为0.92)之间的分离度应符合要求测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,杂质F(相对保留时间约为0.89)杂质A(相对保留时间约为1.60,必要时用杂质A对照品确认)与杂质H(相对保留时间约为244)均不得大于对照溶液的主峰面积(1.0%),杂质B与杂质E(相对保留时间约为1.41)均不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5%),其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(1.0%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍(3,0%)。卡那霉素照薄层色谱法(通则0502)试验供试品溶液取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含阿米卡星25mg的溶液。对照品溶液取卡那霉素对照品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含卡那霉素0.25mg的溶液。 系统适用性溶液取阿米卡星与卡那霉素对照品各适量,加水溶解并稀释制成每1ml中分别约含阿米卡星25mg与卡那霉素0.75mg的溶液。色谱条件采用硅胶G薄层板,以二氯甲烷-甲醇-浓氨溶液(25:40:30)为展开剂测定法吸取上述三种溶液各51,分别点于同一薄层板上,展开,晾干,喷以0.2%茚三酮的水饱和正丁醇溶液,在100℃加热数分钟。系统适用性要求系统适用性溶液中,阿米卡星与卡那霉素斑点应完全分离限度供试品溶液如显卡那霉素斑点,与对照品溶液的主斑点比较,不得更深(1%)残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861第一法)测定。供试品溶液取本品约0.2g,精密称定,置顶空瓶中,精密加入水5ml使溶解,密封对照品溶液取甲醇、乙醇、丙酮和乙腈各适量,精密称定,用水定量稀释制成每1m1中约含甲醇0.12mg、乙醇0.2mg、丙酮0.2mg和乙腈0.016mg的混合溶液,精密量取5ml,置顶空瓶中,密封。色谱条件以6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱;柱温为40℃;进样口温度为140℃;检测器温度为250℃;顶空瓶平衡温度为80℃,平衡时间为30分钟系统适用性要求对照品溶液色谱图中,各主峰间的分离度均应符合要求。测定法取供试品溶液与对照品溶液分别顶空进样,记录色谱图限度按外标法以峰面积计算,甲醇、乙醇、丙酮与乙腈的残留量均应符合规定硫酸盐取本品约0.25g,精密称定,加水100ml使溶解,用浓氨溶液调节pH值至11,精密加氯化钡滴定液0.1mol/L)10ml及酞紫指示液5滴,用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定,注意保持滴定过程中的pH值为11,滴定至紫色开始消褪,加乙醇50ml,继续滴定至紫蓝色消失并将滴定的结果用空白试验校正,每1m1氯化钡滴定液(0.1mol/L)相当于9.606mg硫酸盐(SO4)。本品含硫酸盐按干燥品计算应为21.0%~24.0%(n=1.8)或22.8%~26.0%(n=2)。干燥失重取本品,以五氧化二磷为干燥剂,在110℃减压干燥3小时,减失重量不得过13.0%(通则0831)可见异物取本品5份,每份为制剂最大规格量,加微粒检查用水溶解,依法检查(通则0904),应符合规定。(供无菌分装用)不溶性微粒取本品,加微粒检查用水溶解,依法检查(通则0903),每1g样品中,含10m及10pm以上的微粒不 得过6000粒,含25m及25m以上的微粒不得过600粒。(供无菌分装用)细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1mg阿米卡星中含内毒素的量应小于0.33EU。(供注射用)无菌取本品,用适宜溶剂溶解并稀释后,经薄膜过滤法处理,依法检查(通则1101),应符合规定。(供无菌分装用)
含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含阿米卡星2.5mg的溶液对照品溶液取阿米卡星对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1m1中约含阿米卡星2.5mg的溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂( Spursil柱,4.6mm×250mm,5μm或效能相当的色谱柱);取辛烷磺酸钠1.8g和无水硫酸钠20.0g,加pH3.0的0.2mol/L磷酸盐缓冲液(0.2mol/L磷酸二氢钾溶液,用0.2mol/L磷酸溶液调节pH值至3.0)50ml和水875ml溶解,加乙腈75ml,混匀,作为流动相;流速为每分钟1.3ml;柱温为40℃;检测波长为200nm;进样体积10l系统适用性要求对照品溶液色谱图中,阿米卡星峰的保留时间应在20~30分钟之间,阿米卡星峰与相邻杂质峰之间的分离度应符合要求。测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算供试品中C2H42N5O13的含量。1mg的Ca2Hs3N5O13相当于1000阿米卡星单位
类别
氨基糖苷类抗生素
贮藏
严封,在干燥处保存。
制剂
(1)硫酸阿米卡星注射液(2)注射用硫酸阿米
杂质
质AH2NNH2HNH2C22H43N5O13585.61 4-O-(3-氨基-3-脱氧-α-D吡喃葡萄糖基)-6-O-(6-氨基-6-脱氧-α-D-吡喃葡萄糖基)-1-N-[(2S)-4-氨基-2-羟基丁酰氧基]2-脱氧-L链霉胺 杂质B,NH2OHNH2 C26H5sN6O15686.76 4O-(3-氨基-3-脱氧-α-D吡喃葡萄糖基)-6-0-(6-氨基-6-脱氧-α-D吡喃葡萄糖基)-1,3-N-2[(2S)-4-氨基-2-羟基-丁酰氧基]2-脱氧-L链霉胺杂质ENHOHHOOH C22H43N5O13585.61 4-O-(3-氨基-3脱氧α-D吡喃葡萄糖基)-6-O-[6-[[(2S)4-氨基-2-羟基-丁酰氧基]氨基]-6-脱氧-aD吡喃葡萄糖基]-2脱氧-L-链霉胺杂质F→NH2H OHHOHNH C26H50N6O15686.76 6-O-(3-氨基-3-脱氧-αD吡喃葡萄糖基)-4-O-[6-[(2S)-4-氨基-2-羟基-丁酰氧基]氨基-6脱氧-aD吡喃葡萄糖基]-1N-(2S)-4-氨基2-羟基丁酰氧基]-2-脱氧D链霉胺杂质HH2NNH H4N6O12584.6 6-O-(3-氨基-3-脱氧-α-D吡喃葡萄糖基)-1-N-[(2S)-4氨基-2-羟基丁酰氧基]4O-(2,6-二氨基-2,6-双脱氧-aD吡喃葡萄糖基)-2-脱氧-D-链霉胺
