用线性连续蔗糖梯度快速分离原核细胞的核糖体亚基
大肠杆菌（E. coli ）的核糖体（70S，M＝380万）由50S （M＝180万）
大亚单位及30S小亚单位 （M＝90万）组成，用简单的直线型5—25％蔗糖梯度（在缓冲液中调制）。合适的缓冲液（0.2mM 醋酸镁，10mM
Tris—HCL 及60mM 氯化铵）有利于稳定70S核糖体并有利于50S及30S 亚基的分离
设备：
各型超速离心机（以日立CP—MX为例）但加/减速速率档次必须在5/5以上，日立STF2封管器，取出梯度用日立DGF—U与带流动他的分光光度计配套，自动分部收集器等）
转头：
各种垂直管，角式及水平转头均可完成此实验，本文以日立P65VT2 垂直管转头（65000rpm，416000xg，16×5ml）和PS65T水平转头 （65000rpm，419000xg， 3×5ml）为例
离心管：
P65VT2 5PA 密封管（加满液体后用日立STF2 自动封管器熔封） P65ST 用5PA 薄壁管（梯度液及样品加至距管口3mm）
梯度液：用缓冲液溶解后调制5—25％直线型蔗糖梯度（可以用25％，20％，15％，10％，5％，五档等分总容积后在离心管中直立过夜形成连续梯度），梯度液上铺0.35 ml 样品
离心参数：
P65VT2转头：65000rpm×20分，4℃，加速“5”减速“6”
P65ST转头：65000rpm×45分，4℃，加速“8”减速“8”
结果：
1．P65VT2转头：离心后50S亚基OD峰（260mm）在22％蔗糖梯度附近，峰顶距离离心管口约4.5cm，30S亚基OD峰（260mm）在相当于蔗糖梯度16％附近，峰顶距管口约3.2cm
2．P65ST转头：离心后，50S亚基OD峰（260mm）在17％蔗糖梯度附近，距离离心管口约3.3cm，30S亚基峰顶在13％蔗糖梯度附近，峰尖距管口约2.2cm
相比较P65ST的峰更尖锐，分离效果稍优。
讨论：也可以用其他转头，（如P40ST，P56ST水平转头或其他角式转头，但综合比较实验结果以P65ST 和P56ST最佳。）
