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哺乳类实验动物的遗传质量控制(三)

2020.9.07

2.3 杂交群 hybrids
2..3.1 定义
杂交群:由不同品系或种群之间杂交产生的后代。
2.3.2 命名
杂交群应按以下方式命名:此雌性亲代名称在前,雄性亲代名称居后,二者之间以大写英文字母"X"相连表示杂交。将以上部分用括号括起,再在其后标明杂交的代数(如F1、F2等)。
对品系或种群的名称可使用通用的缩写名称。
例如:(C57BL/6 DBA/2)F1 = B6D2F1
( NMRI X LAC )F2
3 实验动物的繁殖方法
由于近交系与封闭群动物具有不同的遗传特点,因此应分别选择相应的繁殖方法。
3.1 近交系动物的繁殖方法
选择近交系动物繁殖方法的原则是保持近交系动物的同基因性及其基因纯合性。
3.1.1 引种
作为繁殖用原种的近交系动物必须遗传背景明确,来源清楚,有较完整的资料(包括品系名称、近交代数、遗传基因特点及主要生物学特征等)。引种动物应来自近交系的基础群(foundation stock).
3.1.2 近交系动物的繁殖可分为基础群(foundation stock)、血缘扩大群(pedigree expaion stock)和


生产群(production stock)。当近交系动物生产供应数量不是很大时,一般不设血缘扩大群,仅设基础群和生产群。
3.1.2.1 基础群
设基础群的目的,一是保持近交系自身的传代繁衍,二是为扩大繁殖提供种动物。
a) 基础群严格以全同胞兄妹交配方式进行繁殖。
b) 基础群应设动物个体记录卡(包括品系名称、近交代数、动物编号、出生日期、双亲编号、离乳日期、
交配日期、生育记录等)和繁殖系谱。
c) 基础群 (包括血缘扩大群)动物不超过5~7代都应能追溯到一对共同祖先。
3.1.2.2 血缘扩大群
血缘扩大群的种动物来自基础群。
a) 血缘扩大群以全同胞兄妹交配方式进行繁殖。
b) 血缘扩大群应设个体繁殖记录卡。
c) 血缘扩大群动物不超过5~7代都应能追溯到其在基础群的一对共同祖。
3.1.2.3 生产群
设生产群的目的是生产供应实验用近交系动物,生产群种动物来自基础群或血缘扩大群。
a) 生产群动物一般以随机交配方式进行繁殖。
b) 生产群动物应设繁殖记录卡。
c) 生产群动物随机交配繁殖代数一般不应超过4代。
3.2 封闭群动物的繁殖方法
选择封闭群动物繁殖方法的原则是尽量保持封闭群的动物的基因异质性及多态性,避免近交系数随繁殖代数增加而过快上升。
3.2.1 引种
作为繁殖用原种的封闭群动物必须遗传背景明确,来源清楚,有较完整的资料(包括品系名称、近交代数、遗传基因特点及主要生物学特征等)。
为保持封闭群动物的遗传异质性及基因多态性,引禍动物数量要足够多,小型啮齿类封闭群动物引种数目一般不能少于25对。
3.2.2繁殖
为保持封闭群动物的遗传基因的稳定,封闭群应足够大,并尽量避免近亲交配。根据封闭群的大小,选用循环交配法等方法进行繁殖。具体方法如附录A(标准的附录)。
4 近交系动物的遗传质量监测
4.1 近交系动物的遗传质量检测
近交系动物必须符合以下要求:
4.1.1具有明确的品系背景资料,包括品系名称、近交代数、遗传组成、主要生物学特性等,并能充分表明新培育的或引种的近交系动物符合近交系动物符合近交系定义的规定。
4.1.2用于近交系保种及生产的繁殖系谱及记录卡应清楚完整,繁殖方法科学合理。
4.1.3经遗传检测(生化标记基因检测法,皮肤移植法,免疫标记基因检测法等)质量合格。
4.2近交系小鼠、大鼠遗传检测方法及实施
4.2.1生化标记基因检测 biochemical markers
本方法是近交系动物遗传纯度常规检测中的常规方法。
4.2.1.1抽样
对基础群,凡在子代留有种鼠的双亲动物进行检测。
对生产群,按表1要求从每个近交系中随机抽取成年动物,雌雄各半。

 

4.2.1.2生化标记基因的选择及常用近交系动物的生化遗传概貌
近交系小鼠选择位于10个染色体上的13个生化位点,近交系大鼠选择9个生化位点,作为遗传检测的
生化标记。以上生化标记基因的名称及常用近交系动物的生化标记遗传概貌见附录B(标准的附录)。
4.2.1.3结果判断,见表2。


4.2.2皮肤移植法 skin grafting
每个品系随机抽取至少4只相同性别的成年动物,进行同系异体皮肤移植。移植全部成功者为合格,发生非手术原因引起的移植物的排斥判为不合格。
4.3 除以上两种方法外,还可选用其他方法对近交系动物进行遗传质量检测,如毛色基因测试(coat color gene testing)、免疫标记基因检测(immunogenetic makers)、下颌骨测量法(mandible measure-ment)、染色体标记检测(cytogenetic techniques)、DNA多态检测法(DNA markers)等。
4.4 检测时间间隔
近交系动物生产群每年至少进行一次遗传质量检测。


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