上皮细胞类培养实验_肝细胞培养实验
实验方法原理 | 肝实质由大量肝细胞和少量间质组成,人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养;肝脏具有取材方便和易于生长的优点,能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整,有多种功能并具有代谢活化致癌物的能力,适用做多种研究;我国已建有多个人肝癌细胞系。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 一、初代组织块培养 肝组织做组织块培养效果很好。取新鲜肝脏,先剥除被膜和血管等纤维成分,用刀或剪刀把肝剪成1 mm3左右的小块,采用贴壁培养法。肝组织易于贴壁,生长力好,一般次日即可出现生长晕。
1. 把肝组织切成2~4 立方毫米的小块,用不含钙镁的BSS液洗两次。
三、传代培养 待细胞生长连接成片后,用BSS洗一二次,加1:1的0.025 %胰蛋白酶和0.02 %EDTA混合消化3~5 分钟,待细胞回缩,便停止消化,弃掉消化液、用BSS洗一二次,注入营养液、吹打、制成细胞悬液、再接种培养。 展 |