助力阿尔茨海默病筛查——Simoa™平台在神经领域的应用 1
Simoa™（Single Molecular Array）技术是基于单分子免疫阵列技术开发的超灵敏蛋白质检测及研究诊断平台，其灵敏度比传统ELISA技术高出1000倍以上。该技术将蛋白质检测技术带入到单分子、数字化的检测时代，成为飞克级超低丰度蛋白质检测领域真正的王者，主要应用于神经性疾病、肿瘤、炎症、传染性疾病和心血管疾病等领域。
阿尔茨海默病（Alzheimer disease, AD）是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病，我国现阶段有AD患者约500万，65岁以上老年人群中每5人里就有1人有轻度认知障碍。由于AD的病程是一个不可逆的过程，迄今尚无有效的治疗药物和手段，因此做好尽早筛查和诊断极为重要。在此，小编将为大家介绍Simoa™技术是如何助力阿尔茨海默病的筛查及研究的。
题目：
Plasma neurofilament light as a potential biomarker of neurodegeneration in Alzheimer’s diseas
杂志：
Alzheimer's Research & Therapy
影响因子：8.23
研究机构：
德国埃尔朗根-纽伦堡大学、波兰比亚威斯托克医学院
研究背景：
目前，AD的早期诊断主要依靠脑脊液（CSF），因为CSF能够直接反应大脑特异性活动及病理改变的蛋白/多肽等。然而，由于CSF取样的局限性，在早期无症状病例中难以作为筛查工具，也很难用于对疾病进展进行重复监测。因此，针对AD的早期诊断迫切需要开发基于血液的生物标记物用于靶向和相对无创筛选试验。
神经丝（NF）是轴突细胞骨架的主要组成部分，由三种不同分子量的蛋白质链组成：轻链（NfL）、中间链、和重链。NF是高度磷酸化的蛋白质，磷酸化的程度决定轴突的直径。轴突损伤导致NF分子释放到细胞外空间，从而进入体液，如CSF或血浆中。因此血浆中NfL浓度升高有可能是因为神经变性。近日，来自德国的科学家通过Simoa™技术检测血浆中NfL的含量来筛查AD。
研究方法：
收集轻度认知功能障碍（MCI）、早期痴呆（ADD）和非强化对照组AD患者的血浆样本，在Simoa ™技术平台上检测样本中NfL的浓度，同时用ELISA技术检测CSF中四个神经类经典标志物amyloid β (Aβ)1–42、Aβ42/40、Tau和 pTau181的含量作为对比。为了验证分析结果，该研究进一步测试了不同的分析前样品处理程序（反复冷冻/解冻、室温或冰箱储存）对血浆NfL浓度的影响。
研究结果：
①血浆中Nfl的含量在MCI-AD组和ADD组中显著高于对照组
经Simoa™平台检测，血浆中NfL的含量在MCI-AD组和ADD组中分别为38.1±15.9 pg/mL和49.1±28.4 pg/mL，显著高出健康对照组（22.0±12.4 pg/mL）的含量，结果如表1和图1所示。
表1本研究中三组的人口特征、CSF生物标志物的结果和NfL浓度统计表
Aβ：淀粉样蛋白β； MMSE：简易精神状态检查表
图1：
三个组别中未调整的神经丝轻链（NFL）浓度。与MCI-AD组相比，ADD组的浓度接近于更高的临界值。绿色水平线代表最大Youden指数（25.7
pg/ml）的cutoff值，因此对照组与AD （MCI-AD和ADD） 的诊断准确率为 82%。*p＜ 0.05。
研究人员将MCI-AD和ADD这两组患者合并为一个诊断类别，即AD组。再将NfL浓度按年龄绘制成点图，如图2。结果显示NfL浓度和年龄之间有高度显著的相关性（ρ=0.65，p<0.001）。
