重组蛋白质的大规模生产实验
基本方案
碱处理法
| 实验材料 | 重组蛋白质 |
|---|---|
| 仪器、耗材 | 培养瓶 过滤器 |
| 实验步骤 |
1. 在悬浮培养液中培养Sf9细胞，并使之适应无血清培养液。
2. 准备旋转培养瓶，用于按比例扩增Sf9细胞，将合适大小的两孔盖连接在转瓶的一个 侧臂，另用一平盖接在另一侧臂。将一段短管（约6英寸或15 cm）装在通气孔中，末端连接一滤器，借助张力器用管索将管子与通气孔和滤器固牢。
5. 将适应了无血清培养液的细胞接种于经高压灭菌的培养瓶中。将培养瓶装至半满至全满之间，加入足够的无血清培养液以使细胞终密度达到5×105~6×105细胞/ml 至1.5×106细胞/ml。
9. 处理上清得到分泌蛋白或处理细胞得到胞内蛋白。
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