brdu细胞周期实验步骤
1、细胞生长至指数期时，向培养液中加入BrdU，使最终浓度为10μg/ml。
2、44小时加秋水仙素，使每ml中含0.1μg。
3、48小时后常规消化细胞至离心管中，注意培养上清的漂浮细胞也要收集到离心管中。
4、常规染色体制片(见第三部分：染色体技术)。
5、染色体玻片置56℃水浴锅盖上，铺上2×SSC 液，距紫外灯管6cm处紫外照射30分钟。
6、弃去2×SSC液，流水冲洗。
7、Giemsa液染色10分钟，流水冲洗，晾干。
8、镜检100个分裂相，计第一、二、三、四细胞期分裂指数。
9、计算：
细胞周期(Tc)=48/{(M1+2M2+3M3+4M4)/100}(小时)
附：(1)BrdU配制: BrdU 10mg十双蒸水10ml 4℃下避光保存。
(2)2×SSC配制: NaCl 1.75克，柠檬酸三钠•2H2O 0.88克，加水至100ml，4℃保存。
注意事项：BrdU溶液需要避光保存在 4℃冰箱，SSC溶液也需要4℃保存，可根据实验需要分装后高压灭菌
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