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膜片钳常见问题解答(一)

2021.6.07

  1.什么是电压钳与膜片钳,有什么区别?

  答:电压钳技术是通过向细胞内注射一定的电流,抵消离子通道开放时所产生的离子流,从而将细胞膜电位固定在某一数值。由于注射电流的大小与离子流的大小相等、方向相反,因此它可以反映离子流的大小和方向。膜片钳技术钳制的是“膜片”,是指采用尖端经过处理的微电极与细胞膜发生紧密接触,使尖端下的这片细胞膜在电学上与其它细胞膜分离,这大大降低了背景噪声,使单通道微弱的电流得以分辨出来。采用电压钳技术将这片膜的电位钳制在某一数值,可记录到单通道电流。从这点上看,膜片钳技术是特殊的电压钳技术。随着膜片钳技术的发展,它已经不仅仅局限于“膜片”的概念,也不仅仅采用电压钳技术,还常采用电流钳技术。

  2. 离子通道电导的单位是什么?如何换算?

  答:离子通道电导的单位是西门子(Siemens, S),旧称姆欧,即安培/伏特。常用皮西门子(pS),1pS=10E-12 S,

  1,000 pS=1 pA/mV。

  3. MultiClamp 700A中,在放大器和信号器的连接中,放大器的raw output是否需要连接信号器的 ANALOG IN 接口? scaled output,raw output有什么区别?

  答:Raw output为原始信号输出,放大器输出的信号没有经过处理(如滤波、放大等),scaled output为定标输出,输出的信号经过了处理。后者的灵活度大,因此多采用。目前膜片钳放大器多设有scaled output,你可将其与数模转换器(你所说的信号器)的ANALOG IN连接,这样放大器的输出信号就能传送给计算机了,此时已经没有必要再使用Raw output了。若你想记录两个输出,则需要将Raw output与数模转换器的另一个ANALOG IN连接。

  4. 在Clampex的Edit protocol/Wave中,Step和ramp各有什么适用范围?

  答:Ramp多用于电流衰减缓慢的离子通道以及失敏不明显的受体通道的I-V曲线制作,如多用于钾、钙离子通道。而像钠通道,其衰减非常迅速,在持续去极化的情况下,通道很快失活,无法使用ramp,另外诸如烟碱受体通道等具有明显失敏特征的受体通道也不宜采用ramp。

  5. 什么是ramp?有什么作用?

  答:与步阶(step)不同,ramp在pClamp软件中表示施加给细胞的一种逐渐变化的电压或电流,称为“斜坡电压或电流”,可用于作通道I-V曲线。

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