体外翻译的基本方法和决定因素
有两种体外翻译的基本方法:以RNA为模板,或以DNA为模板(即偶联的转录/翻译)。
RNA模板可以是总RNA、mRNA或体外合成的转录子。DNA模板可以是一个质粒,或一个PCR/RT-PCR产物,这个PCR/RT-PCR产物在转录启动子和翻译起点下游含有需要翻译的基因。
选择哪一个体外翻译系统取决于许多因素,这些因素包括要翻译的基因的来源(真核/原核),可提供的模板(如RNA或DNA),和所生产的蛋白质的下游应用。
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