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简述碱性磷酸酶标抗体制备技术的标记步骤

2023.5.31

  (1)取抗体(2~5mg/mL)1mL,加入AP 5mg溶解。

  (2)装入透析袋,用0.01mol/L、Ph7.2PBS4℃透析18h,换液3次。

  (3)加入2.5%戊二醛20uL,室温(20℃±)放置2h。4℃0.01mol/L、pH7.2PBS透析过夜,换液3次。

  (4)移入0.05mol/L、pH8.0Tris-HCl缓冲液中,4℃透析过夜,换液3次。

  (5)取出标记抗体,用含%BSA和0.02%NaN3的Tris-HCl缓冲液稀释至4mL,即为酶标记物原液。

  (6)加入1/3量纯甘油,测定工作效价后,小量(0.1mL)分装,4℃保存(使用前以pH7.4PBS-吐温溶液将结合物适当稀释)。

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