无标记活细胞动态分析技术在神经生物学方面的应用 三
上图为悬浮培养的神经球增殖实验。通过降低载物台的移动速度和加速度，减少震动对体系的影响，悬浮细胞同样能进行成像和分析。实验结果表明，给药处理后显著抑制了神经球的增殖。
六、相差和荧光分析的结合
除了在相差图片上的无标记分析外，Cell-IQ还提供了3种荧光通道，多达30多种荧光滤片的选择，可以满足绝大多数荧光染色的需求。因此，一方面我们可以对已经标记荧光的细胞同时进行相差图片和荧光图片的采集、合并和分析；或者在完成相差图片的采集后，再将细胞固定后进行传统的免疫荧光染色以进一步验证无标记的分析结果。
下图为神经干细胞的分化实验。图A为相差图片，图B为神经元marker
βIII-tubulin的染色结果。在图A和B中，红色箭头所指的神经元突触表明相差图片和荧光染色的结果是相互匹配的。图C的白色短箭头代表的是类神经元细胞，同样在图D的染色中得到了证实（红色）；而图C的白色长箭头在形态上类似于胶质细胞，而这个结果也与图D胶质细胞的
marker vimentin染色（绿色）结果相一致。
结束语：以上是无标记活细胞动态分析技术在神经生物学方面的应用。其中不难看出，无标记分析技术的原理是基于在相差图片的基础上，通过对细胞形态的识别和分辨来对细胞行为变化的各种参数进行实时动态地定量分析。因此，无标记活细胞动态分析技术旨在杜绝一切外界因素（如生物素标记和荧光染色）干扰的情况下，尽可能地让细胞自然地生长从而还原细胞最天然的生理状态，通过在这种“原生态”的细胞上动态观察和实时定量细胞形态、行为的变化，力求记录一个最真实的生物学事情的发生和演变！
 | 平台简介：Cell IQ是芬兰CM Technologies公司生产的一个集培养管理、观察记录和分析于一身的一体式无标记活细胞动态分析系统。其通过ZL细胞封盖系统来实现精密的微小培养室体系，从而保证细胞在最优的生长环境下维持一个健康稳定的状态以进行长期的培养观察和记录。内置的成像系统和专业高灵敏的数码CCD相机，再配合独特的全聚焦和智能追焦技术，可确保活细胞在长时间的生长和运动过程中总处在聚焦范围内，以此获得高质量的细胞相差图片，因此可以对3D细胞样品如神经球和胚胎等进行成像和分析。最后，Cell-IQ强大且创新的的分析软件可在完全无标记的“原生态”细胞相差图像上，通过对其形态的分辨与识别来进行不同细胞种群、周期和时期的区分划类从而完成各种复杂的无标记实验。 |
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