免疫原的制备
一、 颗粒性抗原的制备
颗粒性抗原是指细胞抗原或细菌抗原。
二、 可溶性抗原的制备和纯化
（一） 组织和细胞抗原的粗制
1. 新鲜的组织或器官，经高速组织捣碎机研磨、酶消化、离心等手段，而获得单个细胞。
2. 组织细胞或培养细胞可溶性抗原的制备
（二） 离心分离抗原
差速离心法──低速与高速离心交替进行，用于大小差别较大的颗粒之间的分离。
梯度密度离心法──是一种区带分离法，通过梯度密度来维持重力的稳定性，使分离物在不同的液体比重中得以分离。
（三） 选择性沉淀法
1. 核酸除去法：用氯化锰、硫酸鱼精蛋白、DNA或RNA酶等。
2. 盐析沉淀法：这是最古老而又最经典的蛋白质纯化分离技术。最常用的是饱和硫酸铵。
3. 有机溶剂沉淀法：（乙醇、丙酮）
4. 水溶性非离子型聚合物沉淀法：（PEG聚乙二醇）
（四） 凝胶过滤和离子交换层析
凝胶过滤──它利用微孔凝胶，将蛋白质分子分成大、中、小三种类型，由于它根据分子量的大小来分离蛋白质又名分子筛。
离子交换层析──利用一些带离子基团的纤维素或凝胶，吸附交换带相反电荷的蛋白质抗原，将蛋白质抗原按电荷不同或量的差异分成不同的组分。
（五） 亲和力层析
1. 亲和层析支持物的选择
2. 配体的选择
（1） 抗原或抗体必须单价特异性
（2） 抗原与抗体之间必须有强的亲和力，这种亲和力决定于抗原决定簇的性质、数量。对抗体来说还决定于抗体来源于动物的种类和免疫时间。
（3） 必须有合适的化学基团
3. 抗原或抗体与支持物的结合
将抗原或抗体结合到支持物上的方法很多，有载体结合法、物理吸附法、交联法和网络法等。
4. 亲和层析条件的选择
三、 半抗原免疫原的制备
半抗原单独不能刺激机体产生抗体，它必须与载体结合后才能刺激机体产生相应的抗体。
四、 佐剂
佐剂──是指在免疫动物时，与抗原同时注入的种辅助剂，它能促进抗体的产生。
最常用的佐剂是福氏佐剂，用羊毛脂、石蜡油和卡介苗混合而成。
不完全佐剂──羊毛脂+石蜡油
完全佐剂──羊毛脂+石蜡油+卡介苗
